ЗиЛ 5301 Бычок, Zil — ТТМ Центр
Цена по запросу
Грузоподъемность: 3 тн.
Двигатель: дизель 130л.с ММЗ-245.9 Евро-3, без АБС
В ТТМ Центр вы можете установить любую надстройку, спецфургон на автомобиль ЗИЛ 5301 Бычок. Так же вы можете отремонтировать ваше авто в нашем сервисе.
АМО ЗиЛ 5301 Бычок – это среднетоннажный грузовой автомобиль отечественного производства. Выпускается с 1994 года и до сегодняшнего времени. На данный момент комплектуется двигателями, соответствующими экологическому классу Евро 3. Мощность дизельного мотора составляет 136 л.с., он оснащен турбиной промежуточным охлаждением воздуха.
Грузоподъемность автомобиля составляет 3 тонны, при этом сам гурзовик весит не так уж и много – 3.
Бычок зарекомендовал себя, как универсальный городской малотоннажный грузовик. Небольшие габаритные размеры машины позволяют ей легко передвигаться в транспортном потоке города, при этом разгружаться и загружаться в условиях ограниченного пространства. Автомобиль оснащается пятиступенчатой механической коробкой переключения передач, которая обеспечивает хорошую тягу и экономию топлива на пятой передаче. Рулевое управление оснащается гидроприводом, что существенно упрощает маневрирование.
Раму ЗиЛ 5301 унаследовал от Мерседеса Варио, которая представляет собой лестничную конструкцию с лонжеронами. Такая рама обеспечивает высокую прочность автомобилю, поэтому при столкновениях снижается вероятность складывания конструкции.
Подвеска у машины тоже отличается высокой надежностью и адаптивностью к низкому качеству отечественных дорог. Поэтому грузовик отлично себя чувствует при прохождении дорожных неровностей.
Узнаваемая форма кабины Бычка, действительно внешне напоминающая соответствующее животное, достаточно комфортна и функциональна. Сиденья регулируются по нескольким параметрам, они очень мягкие и удобные. Кабина имеет качественную тепло и звукоизоляцию, что обеспечивает тишину внутри во время движения, а также сохранение тепла в холодные времена года. Также есть варианты исполнения кабин, оснащенных люком или имеющие спальное место для междугородних перевозок.
В целом Бычок производит положительное впечатление, особенно его последние модификации. Не удивительно, что этот автомобиль пользуется огромной популярностью уже на протяжении более 20 лет. Невысокая цена, простота в обслуживании, высокая маневренность, мощный и экономичный мотор, а также надежность всех систем и оборудования делают этот автомобиль одним из самых востребованных в своем классе.
Комплектация
- Кабина трехместная.
- Сиденье водителя отдельное, имеет механизм подрессоривания с регулируемой жесткостью, а также регулировку положения в продольном направлении с регулировкой наклона спинки и подушки.
- Пассажирское сиденье двухместное нерегулируемое.
- Стеклоочиститель трехщеточный с электрическим приводом.
- Омыватель ветрового стекла — насос с электроприводом.
- Отопитель соединен с системой охлаждения двигателя.
- ГУР, набор инструментов, домкрат, огнетушитель, аптечка, знак аварийной остановки.
Размеры стандартных надстроек устанавливаемых на шасси 5301 Бычок
Схема расположения европаллет (1200х800) в кузове
ЗиЛ-3250 — Общественный транспорт Самарской области
Материал из SamaraTrans.
| ЗИЛ-3250 «Бычок» | |
| Технические характеристики: | |
| Мест для сидения: | 19+1 |
| Пассажировместимость: | 22 |
| Двигатель: | ММЗ Д — 245. 12С, дизель |
| Мощность двигателя: | 108,8 л.с. (2400 обортов мин) |
| Расход топлива: | 12,0 (при 90 км/час) |
| Максимальная скорость: | 95 |
| Длина, мм: | 7885 |
| Ширина, мм: | 2210 |
| Высота, мм: | 2800 |
| АМО ЗИЛ | |
После распада Советского Союза спрос на прежнюю продукцию ЗИЛа — грузовые автомобили средней грузоподъемности — значительно упал. Поэтому в середине 90-х годов завод освоил производство малотоннажного грузовика собственной конструкции ЗИЛ-5301 («Бычок»). А в 1999 году на шасси «Бычка» начали выпускать микроавтобусы
[править] Двигатель
ММЗ Д — 245.9 E2
- Тип: дизельный с турбонаддувом и промежуточным охлаждением воздуха
- Рабочий объем, л: 4,75
- Мощность, л.с/кВт: 136/100 (при 2400 об.)
[править] Трансмиссия
- Коробка передач: Механическая, пятиступенчатая
- Ведущий мост: Одноступенчатый гипоидный
- Карданная передача: Открытая, со скользящим шлицевым соединением и промежуточной опорой
[править] Колеса и шины
- Колеса дисковые 6,5Jх16Н2
- Шины бескамерные 225/75R16С
[править] Подвеска
[править] Тормоза
- Передние: дисковые
- Задние: барабанные
[править] Рулевое управление
Рулевой механизм: Со встроенным гидравлическим усилителем
|
Поближе познакомимся с «Бычком»
С. Ионес, фото автора
Отзывы водителей, длительное время работавших на «Бычках», далеко не такие доброжелательные, как отзывы испытателей, откатавших новое исполнение машины на коротком тесте. Все, с кем удалось побеседовать, дружно жаловались на конструктивные недочёты, частые поломки, откровенный заводской брак.
Для начала, немного «лирики». Интересно, о чем думали те, кто давал машине эту «торговую марку»? Они, наверное, забыли, что «Бычок» – не только молодой самец коровы и не только мелкая рыбка, из которой делают консервы «Бычки в томате». Вспомните, что сигарета становится «бычком» после первой затяжки. Водители и механики шутят, что характер автомобиля во многом соответствует именно третьему, жаргонному значению слова «бычок».
И только одну модификацию «Бычка» никак не хочется сравнивать с окурком. К сожалению, очень редкую. Речь идет о машинах с индексом ЗИЛ-53012. Это была самая первая небольшая партия, построенная в 1995 г. Она представляла собой кабину и платформу «Бычка», установленные на шасси Mercedes-Benz 709 D. Главный недостаток этого автомобиля заключается в том, что его крайне сложно купить. Большинство экземпляров, благодаря надежности немецкого шасси, дожило до наших дней. Только вот хозяева всё ещё не спешат избавляться от 10-летних грузовиков: так хороши «мерседесовские» агрегаты.
Кстати, у «Бычка» странный отраслевой индекс: ЗИЛ-5301. Получается, что машина полной массой около 7 т по классу выше, чем 11,5-тонный ЗИЛ-4331. Согласно действующему ГОСТ, индекс «Бычка» должен был начинаться на тройку, в крайнем случае, на четвёрку. Но как так случилось, что его «превратили» в одноклассника базовой модели КамАЗа? Достаточно достоверное объяснение звучит так. Для регистрации нового индекса требовались деньги, которых тогда, в начале 90-х, заводу катастрофически не хватало.
Конечно же, создавая эту машину, конструкторы пытались по максимуму использовать узлы, уже освоенные в производстве – рациональный, оправданный подход. А если вспомним, какая ситуация в экономике страны в целом, и в автомобильной промышленности в частности, сложилась в первой половине 90-х, когда создавали «Бычка», то придем к выводу, что иного выхода у завода просто не было.
Кабина от «большого брата», дизель от трактора, коробка передач от «сто тридцатого», дисковые передние тормоза от бронированной модификации легкового представительского «членовоза»: эти агрегаты пришлось в той или иной мере модернизировать и адаптировать к новой модели. Как это всё «срослось» вместе? Насколько приспособлены такие агрегаты и системы к автомобилю другого класса? Как изменились технические и потребительские свойства, а главное, ресурс узлов по сравнению с теми машинами, с которых их взяли? И как чувствуют себя оригинальные агрегаты «Бычка» в условиях реальной эксплуатации? Эти вопросы, согласитесь, заслуживают обсуждения на страницах журнала.
Кстати, как и в случае с «Газелью», некоторые недостатки «Бычка» можно объяснить предельно сжатыми сроками подготовки производства. Чтобы отрабатывать все тонкости конструкции автомобиля, требовались годы полигонных испытаний и огромные денежные средства. А автомобиль требовался уже вчера, и количество денег было крайне ограничено. Отсюда – многочисленные компромиссы.
Но перейдем от «лирики» к «физике». Кабина от большого грузовика, без сомнения, просторная и с хорошей обзорностью. Даже в некоторых близких по размеру японских грузовиках втроём в кабине более тесно. С «Газелью» вообще никакого сравнения. Двойная кабина – просто огромное помещение. В ней чувствуешь себя, как в салоне автобуса. Например, можно без проблем пройти с передних сидений на задние, и обратно, в щель между шоферским и пассажирским сиденьями. Но вот сами сиденья оставляют желать лучшего. Три одинаковых двухместных «диванчика» в двойной кабине – правый пассажирский и два задних – сделаны действительно как в салоне городского автобуса: жесткие, нерегулируемые, с очень низкими спинками.
В случае сильного удара сзади, всем сидящим гарантирована травма позвоночника. Между прочим, в двойной кабине большого ЗИЛа – та же картина.
Мне возразят: эти сиденья рассчитаны на короткие поездки. А, скажем, рабочие городских ремонтных бригад ездят недалеко и носят спецодежду, в которой незачем садиться в кресла. Но, во-первых, те же сиденья установлены и в бортовом «Бычке», который используют в дальних рейсах. Во-вторых, если это сиденья для рабочих в спецовках, то зачем им тканевая обивка?
Шоферское сиденье стоит особняком: высокое, с регулируемым наклоном подушки и целой системой пружин и амортизаторов, позволяющих регулировать жесткость крепления сиденья к полу кабины. Механизмы регулировки, правда, исполнены грубовато. То же самое можно сказать об устройствах, позволяющих регулировать рулевую колонку и педали. Обычно водители «выставляют» их один раз по своему вкусу, а если за руль садится кто-то другой, просят «не трогать».
Несомненное достоинство «Бычка» – эффективная система отопления.
Даже в двойной кабине тепло в сильные морозы. Прямо на полу в ней стоит не прикрытый никаким кожухом печной агрегат с видимой издалека «жигулевской» клавишей включателя. Он не позволит замерзнуть задним пассажирам.
Ещё что можно отметить в кабине – обивка потолка и стоек приятная на вид, ковровая. Но все обшивки на абсолютно новом автомобиле провисают посередине волнами, так как основание обивок кривое и покоробленное.
Заходить в кабину «Бычка», не спорим, проще, чем во многие импортные машины: большой проём, плюс невысокая посадка, плюс отсутствие колёсной арки. Помогают поручни, установленные на дверях и краях приборной панели. А вот выходить из кабины сложнее. Надо соскочить на исключительно узкую подножку, и сделать это, не обтерев брюками порог кабины, практически невозможно. На большом ЗИЛе такой проблемы нет: там подножка шире.
Многие водители жалуются на шум и вибрацию в кабине. Запустив «тракторный» дизель, выясняем, что это утверждение похоже на правду.
В самом деле, уровень шума и вибрации у большинства «Бычков» превышает допустимую норму. Но «бывалые» говорят, что это поправимо. Прежде всего, надо оклеить внутреннюю поверхность капота и моторный щит внутри кабины обычным шумоизоляционным ковром. Сложностей никаких: подобную операцию тюнинговые фирмы делают отечественным легковым машинам. Совсем исключить шум, конечно, не удастся, но наша задача – просто понизить его уровень.
Проблема вибрации серьёзнее. По мнению специалистов, она возникает из-за неудачных опор силового агрегата на раме. Один водитель горько пошутил: «Замените резиновые подушки крепления двигателя «Жигулей» стальными болванками – получите то, что творится в «Бычке».
А ведь изначально низкорамный ЗИЛ собирались сделать с кабиной над двигателем. В начале 90-х даже был опубликован снимок этого прототипа. Та машина была всего лишь макетом. «Накрыть» двигатель кабиной от ЗИЛ-4331 никак не удавалось. И это, наверное, хорошо. Представляете, в какой «аттракцион» она бы превратилась?
Водители, впервые севшие за руль «Бычка», теряются, не зная, по какой схеме здесь включаются передачи: как на больших ЗИЛах или как на легковых машинах.
Даём правильный ответ: передачи у «Бычка» включаются, как у его «старших братьев» ЗИЛ-130 и ЗИЛ-4333. Только почему бы на рукоятку рычага не нанести схему переключения?
Мы слышали жалобы на ненадёжное сцепление. Оно, кстати, не имеет ничего общего со сцеплением трактора «Беларусь». И не позволяет водить «Бычок», как нормальный отечественный грузовик. Водители тяжелых ЗИЛов на дороге с твердым покрытием всегда трогаются со второй передачи, даже если машина гружёная или с прицепом. На «Бычке» это, конечно, физически можно сделать, но сцепление не выдержит большого количества таких стартов. Здесь придётся «по-легковому» трогаться с первой передачи.
«Бычок» выпускается уже 10 лет, а недостатки всё ещё остаются и усугубляются удручающе низким качеством заводской сборки. Хотя доводилось слышать, что самым катастрофическим качество автомобилей было примерно в 2000–2002 гг. Сейчас, говорят, стало чуть-чуть лучше…
…Год 2005. На небольшой автобазе одной московской хозяйственной организации рассматриваем новый «Бычок», только что пришедший с завода и зарегистрированный в ГАИ.
Два опытных электрика никак не могут разобраться с проводкой. Множество перепутанных, не совпадающих друг с другом по цвету и никуда не присоединенных проводов. Грузовичок аварийной службы должен работать с прицепом-генератором. Чтобы заработали световые приборы прицепа, приходится «перебирать» весь разъём фаркопа.
Затем начинаются долгие и безуспешные попытки включить предпусковой подогреватель. В инструкции по эксплуатации ничего не сказано о том, по какому принципу это устройство должно работать. Схема подключения подогревателя, описанная в инструкции, имеет мало общего с тем, что установлено на машине. В контрольной лампе, сигнализирующей о работе подогревателя, обнаруживаются два минусовых (!) и ни одного плюсового (!) провода. Приходит ещё один механик, который вспоминает, что на «Бычке» его знакомого, эксплуатируемом года с 1998-го, включить предпусковой подогреватель не удалось совсем.
На улице –10, но машина ночует в гараже, и дизель легко заводится без помощи подогревателя.
Пока он прогревается, сиденье водителя превращается в настоящий вибрационный стенд, но это, как мы говорили выше, нормальное явление. После прогрева несколько перегазовок, и тяжелая двойная кабина стоящего грузовика начинает неприятно раскачиваться вправо-влево. Это ещё что?
Включаем аварийную сигнализацию – контрольная лампа на приборной панели нормально мигает. Двигаем рычаг, включая правый и левый указатели поворотов, и та же лампа отказывается работать, моргнув один-два раза, гаснет. Опять проводка? Это, говорят, ещё не самое худшее.
Ремонтник, имевший дело с машиной 1998 г., вспоминает, что на ней «с завода» хронически не хотели работать тормоза задних колёс. Неоднократные прокачки не давали результата. Долгое время водителю приходилось ездить, тормозя только передними дисковыми механизмами. Наконец, руки дошли до полной разборки. Оказалось, что задние тормозные цилиндры заполнены консервационной смазкой, которую «забыли» удалить на конвейере.
Комментарии излишни.
Поймите нас правильно. Мы ни в коем случае не разделяем «радикальное» мнение отдельных водителей, заявляющих, что «Бычок» – «никуда не годное» транспортное средство, продолжать выпуск которого незачем. Мы не желаем зла ни тем, кто проектировал, ни тем, кто строит эти машины. Нам ни капельки не хочется, чтобы территория старейшего российского автозавода оказалась использованной под какие-то очередные торговые комплексы и элитные кварталы. Пусть уж лучше стоит на старом месте конвейер, пусть сходят с него эти грузовички, вполне вписавшиеся в условия нынешней экономики и приносящие прибыль своим хозяевам.
Однако мы уверены – «Бычок» можно сделать лучше. Что делает завод для улучшения качества своей продукции? Какие узлы машины подвергались модернизации, и какие планируется улучшить? Наконец, что мешает заводу собирать машины хотя бы с меньшим количеством заводского брака? Мы приглашаем сотрудников АМО ЗИЛ к обсуждению этих вопросов и с удовольствием выслушаем их мнение.
А ещё мы готовы рассказывать о «народных» способах улучшения потребительских качеств «Бычка», о тюнинге систем этой машины, который проводят водители, гаражные умельцы и, возможно, ремонтные предприятия.
| Масса перевозимого груза, кг | 3450 |
| Масса снаряженного автомобиля, кг | 3350 |
| Распределение нагрузки на дорогу от снаряженной массы через шины, Н (кгс): | |
| передних колес | 19000 (1900) |
| заднего моста | 14500 (1450) |
| Допустимая полная масса автомобиля, кг | 6950 |
| Допустимые нагрузки на дорогу от полной массы через шины, Н (кгс): | |
| передних колес | 23500 (2350)* |
| заднего моста | 49000 (4900) |
| Внутренние размеры платформы, мм | 3750х2254х450 |
| Радиус поворота, м | 7,8 |
| Максимальная скорость, км/ч | 95 |
| * перераспределение максимальных нагрузок на оси должно соответствовать полной массе 6950 кг | |
| Двигатель | |
| Модель | ММЗ Д-245. 9 Е3 |
| Тип | дизельный с турбонаддувом и промежуточным охлаждением воздуха |
| Рабочий объем, л | 4,75 |
| Мощность, л.с/кВт | 95,7/130 |
| при мин-1 | 2400 |
| Сцепление | Однодисковое |
| Коробка передач | Пятиступенчатая |
| Ведущий мост | Одноступенчатый гипоидный |
| Карданная передача | Два карданных вала с тремя шарнирами, скользящим шлицевым соединением и промежуточной опорой |
| Колеса и шины | |
| Колеса дисковые | 6,5Jх16Н2 |
| Шины бескамерные | 225/75R16С |
| Рулевой механизм | Со встроенным гидравлическим усилителем |
| Тормозные механизмы | |
| Передние | дисковые |
| Задние | барабанные |
| Электрооборудование | Однопроводная система с номинальным напряжением 24В. |
| Кабина | Двухместная, удлиненная, двухдверная с двумя спальными местами |
Вместимость грузовых автомобилей
В статье представлены грузоподъемность, размеры, вместимость палет различных кузовов грузовых автомобилей.
Внимание! Статья находится в режиме постоянного редактирования.
Вместимость популярных грузовых автомобилей
Бортовые| Тип грузового кузова | Грузоподъемность, т | Длина, м | Ширина, м | Высота борта, м | Входит европаллет (1,2х0,8м), шт | Входит паллет (1,2х1м), шт |
| Газель-3302 | 1,5 | 3,09 | 1,98 | 0,40 | 4 | |
| Газель удлиненный | 1,5 | 4,2 | 1,9 | 6 | ||
| ЗИЛ-5301 Бычок | 3,13 | 3,75 | 2,25 | 0,45 | ||
| ЗИЛ-5301 Бычок удлиненный | 3,13 | 4,38 | 2,25 | 0,45 | ||
| ЗИЛ-433360, 432930 | 6 | 3,81 | 2,42 | 0,60 | ||
| ЗИЛ-433110 | 6 | 4,71 | 2,42 | 0,60 | ||
| КАМАЗ-55102 Колхозник | 7 | 5,34 | 2,32 | 8 | ||
| КАМАЗ | 10 | 6,1 | 2,4 | |||
| Фура | 20 | 12 | 2,4 | |||
| Еврофура | 20 | 13,6 | 2,45 | 20-22 |
| Тип грузового кузова | Грузоподъемность, т | Длина, м | Ширина, м | Высота, м | Объем, м3 | Входит европаллет (1,2х0,8м), шт | Входит паллет (1,2х1м), шт |
| Газель | 1,5 | 3 | 1,9 | 1,5 | 9 | 4 | |
| Газель удлиненная | 1,5 | 4,1 | 1,9 | 2 | 6 | ||
| ЗИЛ-Бычок | 3 | 3,75 | 2,25 | 2,2 | 17 | 6 | |
| МАЗ/КамАЗ | 10 | 6 | 2,4 | 2,5 | 8 | ||
| Фура | 20 | 12 | 2,4 | ||||
| Еврофура | 20 | 13,6 | 2,45 | 2,45 | 82 | 20 |
| Тип грузового кузова | Грузоподъемность, т | Длина, м | Ширина, м | Высота, м | Объем, м3 | Входит европаллет (1,2х0,8м), шт | Входит паллет (1,2х1м), шт |
| Тип грузового кузова | Грузоподъемность, т | Длина, м | Ширина, м | Высота, м | Объем, м3 | Входит европаллет (1,2х0,8м), шт | Входит паллет (1,2х1м), шт |
| Лада Ларгус фургон | 0,80 | 1,80 | 0,98 | 0,92 | |||
| Газель-2705 цмф | 1,5 | 3,14 | 1,83 | 1,50 | 9 | 4 | |
| 20-футовый контейнер | 10-20 | 6 | 2,4 | 2,4 | 34 | 11 | |
| 40-футовый контейнер | 20-28 | 12 | 2,4 | 2,4 | 68 | 22 | |
| Полувагон | 12,7 | 2,9 | |||||
| Крытый вагон | 13,8 | 2,7 |
| Тип грузового кузова | Грузоподъемность, т | Длина, м | Ширина, м | Высота, м | Объем, м3 | Объем с горкой, м3 |
Грузоперевозки Бычок 3 тонны — перевозки 3 тонны от компании Эксимтранс
Грузоподъемность, т
3
1 час работы, р.
700
За 1 км за МКАД, р.
24
Минимальный заказ, р.
4 900
Перевозки 3 тонны на автомобиле ЗИЛ Бычок занимает первое место по объему среднетонажных грузовых перевозок. Вследствие большого объёма кузова и грузоподъёмности, ЗИЛ «Бычок» очень популярен у клиентов нашей транспортной компании, так как является самым доступным автомобилем для перевозки 3 тонн груза. Недорогие перевозки Бычком по Москве никак не сказываются на качестве проделанных услуг. Бычок трехтонник очень удобен для проведения переезда, будь то квартирный, дачный или офисный переезд. В случае, если надо переехать с одного места жительства на другое или в другой город,наши автомобили подойдут просто идеально.
«Бычки» бывают как простые, так и с удлинённой базой, длина которых достигает 6 метров. Эти автомобили подходит для грузов, тоннаж которых не превышает 3 тонн.
Следует отметить, что возможна верхняя и боковая загрузка автомобиля, что в некоторых случаях является просто необходимым. Грузоперевозки Бычком на 3 тонны помогут сэкономить на количестве повторных рейсов (объем груза может достигать 25 куб. м), что позволяет перевозить достаточно объемные грузы.
| Бычок: | Бычок удлинённый: |
| Длина: 4,2 м | Длина: 4,8-6 м |
| Ширина: 2,05 м | Ширина: 2,05-2,25 м |
| Высота: 2,05 м | Высота: 1,85-2,05 м |
| Объём: 20 кубов | Объём: 22-25 кубов |
| Грузоподъёмность: 3 тонны | Грузоподъёмность: 3 тонны |
Перевозки Зил Бычок подходит для осуществления грузовых перевозок как по Москве, так и по Московской области. Автомобили используются для грузоперевозки различных видов грузов: строительных материалов, мебели, оборудования различного назначения.
Мы располагаем широким выбором машин :
- зил бычок фургон 20 кубов
- зил бычок фургон 22 куба
- бортовой зил бычок
- тент зил бычок
Если Вы запланировали переезд , для транспортировки мебели, то самый оптимальный вариант – заказать грузоперевозки у нас. На нашей электронной страничке всегда можно заказать бычок недорого, и получить отвечающие всем требованиям грузоперевозки.
Вы можете заказать ЗИЛ Бычок 3 тонны для грузоперевозок, а также помимо заказа этого автомобиля ещё и подать заявку на грузчиков. Заказав автомобиль и грузчиков для перевозки по Москве и московской области у нас, Вы можете совершенно не переживать о сохранности вашего личного имущества.
Цены на грузовые перевозки и другого грузового автотранспорта вы можете узнать в разделе Тарифы на грузоперевозки.
тарифы на грузовой транспорт с водителем
Грузоперевозки на а/м ЗИЛ-Бычок отличаются от перевозок на а/м Газель наличием вместительного кузова от 16 до 24 м³, грузоподъёмностью 3 тонны, что делает возможным перевозку значительно большего объёма груза.
Заказывают а/м ЗИЛ-Бычок при любых крупных переездах, офисных, квартирных, дачных. Высота кузова 2 метра позволяет перевозить высокую мебель, крупную мягкую мебель, большие холодильники, рояли. Длина кузова 5 метров даёт возможность перевозить практически любые негабаритные грузы. Аренда а/м ЗИЛ-Бычок возможна только с водителем, который выполнит услуги экспедитора, а профессиональные грузчики, такелажники и сборщики мебели помогут в погрузо-разгрузочных работах, при необходимости вручную перенесут тяжёлые и негабаритные предметы, качественно разберут и соберут любую мебель.
«Бычок» заказать недорого в ТК Автовозов
Для проведения переезда в компании Автовозов доступен в аренду автомобиль ЗИЛ бычок 3 тонны , который рассчитан на перевоз габаритных грузов. Транспорт может предоставляться как в сопровождении водителя, так и без него.
В столице крайне популярны грузоперевозки машиной бычок. Москва – мегаполис, в котором необходимость переездов возникает ежеминутно.
Бычок – автомобиль, который позволяет эффективно справляться с доставкой мебели, техники и иного имущества в условиях загруженности дорог.
Воспользовавшись удобной формой подачи заявки, вы можете заказать бычок по Москве в почасовую аренду по выгодному тарифу. Стоимость услуг ТК Автовозов является одной из самых низких на отечественном рынке. Возможность заказа сборщиков мебели и такелажников по оптимальным ценам также является значимым преимуществом компании в сравнении с конкурентами.
Машина Бычок позволяет транспортировать груз высотой 2 и длиной 5 метров, весом до 3 тонн. Такая вместительность делает возможной перевозки в автомобиле таких габаритных предметов, как диван или холодильник.
Заказав ЗИЛ бычок в аренду с водителем в ТК Автовозов, вы принимаете верное решение о выборе исполнителя транспортных услуг. Мы любим свою работу и относимся с ней с максимальной долей ответственности. Никаких простоев грузчиков! Никаких задержек транспорта! Своевременное выполнение запланированных работ – залог успеха нашей коммерческой деятельности.
Презентация услуги
(PDF) Ревизия рода бычков Gnatholepis Bleeker (Teleostei, Gobiidae, Gobionellinae) с описанием нового вида
Zootaxa 3529 © 2012 Magnolia Press · 31
РЕВИЗИЯ РОДА GOBY GENUS GNATHOLEPIS
MINGLEPIS, Симиланские острова, 14 февраля 1979 г. ИНДОНЕЗИЯ: RMNH 4523, голотип Gobius cauerensis, 1 (31,5),
Кауэр, Суматра, П. Бликер, 1852-54; NSMT P.70196, 3 (13–35), у северо-западного побережья острова Эйр, Ломбок, К. Мацуура, 3
февраль 1994 г .; НСМТ П.70407, 2 (25–29.5), Герупук, Ломбок, К. Мацуура, 7 февраля 1994 г .; USNM 210157,
45 (13–33), восточный берег залива Пиру, Танджунг Лян, Керам, В.Г. Спрингер и М. Гомон, 10 января 1973 года. ТАЙВАНЬ:
ASIZP P.56809, 3 (38–39), Таузуван, С.С. Ли, 25 мая 1987 года; USNM 327456, 22 (26.5–52), юго-западный берег недалеко от
Chuan-fan-Shi, V.G. Springer and party, 30 апреля 1968 года. ЯПОНИЯ: AMS I.23492-015, 1 (34,5), приливные бассейны ниже
аэропорта, Миякедзима, Д.
Ф. Хозе и Й. Його, 14 мая 1980 года; AMS I.27367-007, 1 (27), залив Амитори, Ириомотэ —
джима, 16 февраля 1976 года; NSMT-P49186, 2 (27–33), Исигаки-дзима, группа Яэяма, острова Рюкю, 10 декабря
1995. ФИЛИППИНЫ: AMS I.21907-003, 4 (16–34), юг Анилао, провинция Батангас, К. Феррарис и Э. Мерди, 22,
,апреля 1980 г .; AMS I.40155-059, 1 (36), южное побережье острова Амбулонг, группа MIN, 1 июня 2000 г .; AMS I.40161-079,
3 (26.5–31), остров Миндоро, 3 июня 2000 г .; USNM 298581, 6 (38–47), остров Яами, Батанес, 26 апреля 1987 года.
АВСТРАЛИЯ: AMS I.28993-009, 1, западная сторона возле мыса Рэк, Северный остров Килинг, Кокосовые острова;
AMS I.19641-022, 2 (37,5–40), у берега реки Тантабидди, Западная Австралия, G.R. Аллен, 27 июня 1975 г .; AMS I.33749-
122, 12 (19–33), северная лагуна восточной стороны, Boot Reef, Coral Sea, группа FNQ, 28 января 1993 г .; NTM S.13618-020,
8 (23–34), северная лагуна восточной стороны, Boot Reef, Coral Sea, группа FNQ, 28 января 1993 г .
; AMS I.20774-107,
7 (24.5–40), северная оконечность безымянного рифа, мыс Мелвилл, Квинсленд, исследование AMS-AIMS, 9 февраля 1979 г .; AMS
I.20757-072, 10 (21–36), западный конец острова Рейн, Квинсленд, AMS I.22635-005, 1 (35,5), Escape Reef North,
ноябрь 1981 г .; Обзор AMS-AIMS, 13 февраля 1979 г .; AMS I.17445-049, 1 (42.5), разрез C, остров Уан-Три,
F. Talbot and party, 19 сентября 1968 г .; USNM 308212, 15 (33–39), рифовая равнина на юго-восточной стороне острова Уан-Три,
Квинсленд, V.Г. Спрингер и партия, 27 ноября 1966 г .; AMS IB.3916, голотип Gnatholepis inconsequens,
1 (32,5), остров Херон, Квинсленд, Р. Слэк-Смит, 1957; AMS IB.4004, 2 (37–42,5), остров Херон, Квинсленд,
Р. Слэк-Смит, 1957; AMS I.30310-034, 1 (26), юго-западная сторона Северного Солитарного острова, Новый Южный Уэльс, 5 мая 1977 г .;
AMS I.18659-001, 1 (36), Сил-Рокс, Новый Южный Уэльс, 10 мая 1985 г .; AMS I.19500-003, 1 (31.5), Parsley Bay,
Sydney Harbour, Новый Южный Уэльс, R.
Куйтер, 2 февраля 1976 г .; AMS I.27156-035, 7 (33–53), лагуна, Элизабет
Риф, Тасманово море, С. Ридер, А. Гилл, Д. Ледбиттер, 14 декабря 1987 г .; AMS I.27142-030, 6 (33–55), лагуна,
Риф Миддлтон, Тасманово море, группа AMS, 7 декабря 1987 г .; AMS I.27138-055, 11 (21–44), центральная лагуна,
Риф Миддлтон, Тасманово море, С. Ридер, А. Гилл, Д. Ледбиттер, М. Корделл, 5 декабря 1987 г. НОВАЯ ГВИНЕЯ:
NTM S.13661-047, 5 (23.5–40), внешний барьерный риф к югу от пролива Раш, Маданг, H.К. Ларсон и М. Джебб, 5
октябрь 1992 г .; NTM S.13691-016, 1 (30), остров S end Tab, недалеко от исследовательского института Christensen, Маданг, H.K.
Ларсон и М. Джебб, 25 октября 1992 года; NTM S.13685-044, 3 (20–40), северный риф острова Таб, недалеко от Кристенсена
Исследовательский институт, Маданг, Х.К. Ларсон и М. Джебб, 21 октября 1992 г. МИКРОНЕЗИЯ: USNM 224767,
4 (27–30), северное побережье Понапе, Каролинские острова, 4 сентября 1980 г.
СОЛОМОНСКИЕ ОСТРОВА: NTM S.12714-008, 1 (37),
Риф лагуны Мунда, С. Блабер, май 1989 г. FIJI: USNM 243062, 6 (25–33,5), остров Янута, Она Ллау, группа Лау
(Восточный архипелаг), 29 Апрель 1982 г .; РПБМ 14591, 2 (27,5–30,5), за пределами барьерного рифа Мбенгга, проход для фрегатов,
Вити-Леву, 11 марта 1973 г. ТОНГА: USNM 340186, 1 (25), остров Офолонга, группа Хаапай, 12 ноября 1993 г.
НОВАЯ КАЛЕДОНИЯ: MNHN 1980-744, 1 (36), коралловый риф, П. Лабут и Мену, январь 1979 г. ВАНУАТУ: AMS
I.37905-034, 1 (28), деревня Сивири, остров Эфате, Дж. Уильямс и партия, 4 мая 1997 г. КИРИБАТИ: USNM 116115,
1 (32,5), пролив острова Халл, острова Феникс, LP Schultz, 1939. МАРШАЛЛ ОСТРОВА: USNM 34429,
голотип Gnatholepis scapulostigma, 1 (36,5), остров Энгеби, Эневатак, А. Д. Веландер, 11 августа 1949 г. AMS
I.37692-002, 1 (36,5), атолл Эниветок, Р. Нолан, 28 мая 1972 г. ГАВАИИ: BPBM 37847, голотип Gnatholepis
cauerensis hawaiiensis, 1 (35), северный берег у побережья Пупукеа, Оаху, Р.
Holcom, август 1997 г. BPBM 37861, 3 (14–38.5),
Коаст-Кост у аэропорта, Гавайи, Дж. Рэндалл, 22 сентября 1997 г .; BPBM 15131, 13 (24–42), собственность Болдуина Пакера
, Мауи, У. Гослайн и Э. Хантер, 5 августа 1955 г. ОСТРОВА ОБЩЕСТВА: CAS 51602, 5 (26–36), западная сторона
Бухта Папетоаи, Муреа, 18 сентября 1956 года; CAS 51528, 1 (24,5), внутри перевала Тепуто, округ Папеари, Таити, 4 июля
1957; BPBM 8108, 2 (24,5–35), Попоте-Бэй, Папара, Таити, 13 марта 1969 г.MNHN 1980-94, 1 (32,5), Гамбье
о-ва, П. Фурмануар; AMS I.22176-003, 4 (33–37), залив Ахаху, Нуку-Хива, 3 сентября 1976 г .; BPBM 11869,
8 (21–53), северная часть залива Ханау, Фату-Хива, Маркизские острова, Дж. Рэндалл, Д. Кэнной, Р. Макнейр, 21 апреля 1971 г .; РПБМ
11003, 2 (29,5–42), западная сторона Уа Хука, северная часть горы Такатаи, Маркизские острова, Дж. Рэндалл, Дж. Хейвуд, Р. Макнейр, 7 мая 1971 года;
BPBM 12621, 3 (28–39), южный конец бухты Акуоа, Нуку-Хива, Маркизские острова, Дж.
Рэндалл, Д. Брайант, Р. Макнейр, 12 мая
1971 г .; BPBM 10398, 1 (330, залив Хеване, Хана, Тахуата, Маркизские острова, 16 октября 1961 года; BPBM 12764, Нуку-Хива,
,Маркизские острова, 16 мая 1971 года; BPBM 17276, голотип Gnatholepis cauerensis australis, SL 41 мм, вход в
).Haurei Bay, Рапа, Острова Острал, J.Рэндалл и Д. Кэнной, 10 февраля 1971 г .; BBPBM 38376, 1 (35.5), вход
УСЛОВИЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ
Этот pdf-файл предоставлен Magnolia Press для личного / исследовательского использования.
Коммерческая продажа или хранение в публичной библиотеке или на веб-сайте запрещены.
Филогенетический анализ рода Gobionellus (Teleostei: Gobiidae) в JSTOR
Кладистический анализ рода бычковых рыб Gobionellus, в первую очередь с использованием признаков посткраниального осевого скелета и системы боковых головок, показал, что этот род в историческом понимании является полифилетическим.Его современное признание основано на признаках, общих для многих видов бычков-гобионеллинов.
Одна группа из шести видов наиболее близка к роду Gobioides. Эта группа включает Gobionellus oceanicus и сохраняет название Gobionellus. Gobionellus диагностируется по обширному окуло-лопаточному каналу, идущему от морды до заднего края жаберной крышки с уникальным рисунком пор A’BCDFHKL, дистально расширенным четвертым нервным отростком, имеющим лопатообразную форму у пяти из шести видов, вертикальный ряд невромасты на заднем поле жаберной крышки, удлиненные жаберные тычинки на передней поверхности и лопасти на задней поверхности наджаберной кости первой жаберной дуги.Никаких однозначных синапоморфий для рода, за исключением Gobioides, не предлагается. Пятнадцать видов, ранее отнесенных к Gobionellus, более тесно связаны с видами родов Oxyurichthys, Oligolepis и Evorthodus. Эти виды переведены в возрожденный род Ctenogobius, типовым видом которого является Ctenogobius fasciatus. Ктеногобиус диагностируется по сокращенному окуло-лопаточному каналу, который заканчивается над предкрышкой с рисунком A’BCDFH ‘, простым или треугольным четвертым нервным отростком, диагональным задним оперкулярным рядом нейромаста и отсутствием долей или жаберных тычинок на передней поверхности первый наджаберный. Отсутствие лопастей или жаберных тычинок на передней поверхности первой наджаберной кости является для рода синапоморфным. Один вид, первоначально помещенный в Gobionellus, Oxyurichthys stigmalophius, демонстрирует две синапоморфии, диагностирующие Oxyurichthys — поперечно раздвоенный третий нервный отросток и отсутствие преоперкулярного канала. У него также есть другие производные черты, характерные для большинства видов Oxyurichthys — округлый край на языке, перепончатый гребень на затылке, укороченная небная кость и единственный ряд зубов в верхней челюсти.Обсуждаются предполагаемые синапоморфии гобионеллинов общего Evorthodus, Gobioides, Oligolepis и Stenogobius.
Copeia — это всемирно уважаемый, широко цитируемый ежеквартальный журнал, в котором публикуются оригинальные исследования рыб, амфибий и рептилий с упором на систематику, экологию, сохранение, поведение, генетику, морфологию и физиологию.
Американское общество ихтиологов и герпетологов посвящено
научное изучение рыб, амфибий и рептилий.
Основные акценты
Общество должно увеличивать знания об этих организмах, распространять
эти знания посредством публикаций, конференций, симпозиумов и других средств,
и поощрять и поддерживать молодых ученых, которые будут делать успехи в будущем.
в этих областях. Программы Американского общества ихтиологов и
Герпетологи участвуют в глобальных усилиях по интерпретации, пониманию и сохранению
природное разнообразие Земли и способствовать разумному использованию природных ресурсов
на благо человечества.
Opsin Evolution in Damselfish: конвергенция, разворот и параллельная эволюция на разных сайтах настройки
Allen GR (1991) Проклятия мира. Аквариумные системы, Melle
Google ученый
Базинет А.Л., Каммингс М.П. (2008) Решетчатый проект: среда исследования и производства грид, сочетающая несколько моделей грид-вычислений. В: Weber MHW (ред.) Распределенные и сетевые вычисления — наука сделана прозрачной для всех.Принципы, приложения и поддерживающие сообщества. Rechenkraft.net, Марбург, стр. 2–13
Google ученый
Базинет А.Л., Каммингс М.П. (2011) Вычисление дерева жизни — использование мощи настольных и сервисных сетей. В: Труды пятого семинара по настольным сетям и добровольным вычислительным системам (PCGrid), Анкоридж, AK
Bellwood DR (1996) Эоценовые рыбы Монте-Больки: самое раннее скопление рыб коралловых рифов.Коралловые рифы 15: 11–19
Google ученый
Bowmaker JK (1995) Визуальные пигменты рыбы.
Prog Retin Eye Res 15: 1–31
Статья Google ученый
Briscoe AD (2001) Функциональная диверсификация опсинов чешуекрылых после дупликации гена. Mol Biol Evol 18: 2270–2279
PubMed Статья CAS Google ученый
Carleton KL, Spady TC, Cote RH (2005) Семейства палочек и колбочек опсинов различаются по спектральным доменам настройки, но не по доменам, передающим сигнал, по данным насыщенного эволюционного анализа следов.J Mol Evol 61: 75–89
PubMed Статья CAS Google ученый
Карлтон К.Л., Спади Т.С., Стрелман Дж. Т., Кидд М.
Р., Макфарланд В. Н., Лоу Е. Р. (2008) Зрительная чувствительность, регулируемая гетерохронными сдвигами в экспрессии гена опсина. BMC Biol 6:22
PubMed Статья Google ученый
Карвалью Л.С., Коуинг Дж. А., Уилки С. Е., Боумейкер Дж. К., Хант Д. М. (2007) Молекулярная эволюция визуальных пигментов птиц, чувствительных к ультрафиолету и фиолету.Mol Biol Evol 24: 1843–1852
PubMed Статья CAS Google ученый
Чанг BSW, Crandall KA, Carulli JP, Hartl DL (1995) Филогения и эволюция опсинов: модель голубых сдвигов в регуляции длины волны. Mol Phylogenet Evol 4: 31–43
PubMed Статья CAS Google ученый
org/ScholarlyArticle»>Collin SP, Knight MA, Davies WL, Potter IC, Hunt DM, Trezise AEO (2003) Древнее цветовое зрение: множественные гены опсина у предковых позвоночных.Curr Biol 13: R864 – R865
PubMed Статья CAS Google ученый
Cooper WJ, Westneat MW (2009) Форма и функция стрекозных черепов: быстрая и повторяющаяся эволюция в ограниченное количество трофических ниш. BMC Evol Biol 9:24
PubMed Статья Google ученый
Купер В.Дж., Смит Л.Л., Вестнет М.В. (2009) Изучение радиации разнообразного семейства рифовых рыб: филогенетика стрекоз (Pomacentridae) с новыми классификациями, основанными на молекулярном анализе всех родов.Mol Phylogenet Evol 52: 1–16
Статья Google ученый
Coughlin DJ, Strickler JR (1990) Зоопланктон, пойманный рыбой кораллового рифа: адаптивный ответ на уклончивую добычу. Environ Biol Fishes 29: 35–42
Статья Google ученый
Ebrey T, Koutalos Y (2001) Фоторецепторы позвоночных. Prog Retin Eye Res 20: 49–94
PubMed Статья CAS Google ученый
Fasick JI, Robinson PR (1998) Механизм спектральной настройки зрительных пигментов дельфинов.Биохимия 37: 433–438
PubMed Статья CAS Google ученый
Frederich B, Fabri G, Lepoint G, Vandewalle P, Parmentier E (2009) Трофические ниши тринадцати стрекоз (Pomacentridae) в Большом Ресифе Толиара, Мадагаскар.
Ichthyol Res 56: 10–17
Статья Google ученый
Геннер М.Дж., Зеехаузен О., Лант Д.Х., Джойс Д.А., Шоу П.В., Карвалью Г.Р., Тернер Г.Ф. (2007) Возраст цихлид: новые даты для излучения древних озерных рыб.Mol Biol Evol 24: 1269–1282
PubMed Статья CAS Google ученый
Giegerich R, Meyer F, Schleiermacher C (1996) GeneFisher — программное обеспечение для обнаружения постулируемых генов. Proc Int Conf Intell Syst Mol Biol 4: 68–77
PubMed CAS Google ученый
Goldman N, Yang Z (1994) Основанная на кодонах модель нуклеотидного замещения для последовательностей ДНК, кодирующих белок.
Mol Biol Evol 11: 725–736
PubMed CAS Google ученый
Goldsmith TH (1990) Оптимизация, ограничения и история эволюции глаз. Q Rev Biol 65: 281–322
PubMed Статья CAS Google ученый
Hart NS (2001) Визуальная экология птичьих фоторецепторов. Prog Retin Eye Res 20: 675–703
PubMed Статья CAS Google ученый
Харт Н.С., Хант Д.М. (2007) Птичьи визуальные пигменты: характеристики, спектральная настройка и эволюция.Am Nat 169: S7 – S26
PubMed Статья Google ученый
org/ScholarlyArticle»>Гавришин К.В., Мойер HD, Эллисон В.Т., Хаймберг Т.Дж., МакФарланд В.Н. (2003) Многомерная поляризационная чувствительность у стрекоз. J Comp Physiol A 189: 213–220
CAS Google ученый
Hofmann CM, Carleton KL (2009) Дублирование генов и дифференциальная экспрессия генов играют важную роль в диверсификации зрительных пигментов у рыб.Интегр Комп Биол 49: 630–643
PubMed Статья CAS Google ученый
Hofmann CM, O’Quin KE, Marshall NJ, Cronin TW, Seehausen O, Carleton KL (2009) У глаз есть это: регуляторные и структурные изменения лежат в основе разнообразия зрительных пигментов цихлид. PLoS Biol 7 (12): e1000266
PubMed Статья Google ученый
org/ScholarlyArticle»>Hofmann CM, O’Quin KE, Marshall NJ, Carleton KL (2010) Взаимосвязь между пропусканием линз и экспрессией гена опсина у цихлид из озера Малави.Vis Res 50: 357–363
PubMed Статья CAS Google ученый
Хант Д., Дулай К., Партридж Дж., Коттрилл П., Боумейкер Дж. (2001) Молекулярная основа для спектральной настройки визуальных пигментов удочки у глубоководных рыб. J Exp Biol 204: 3333–3344
PubMed CAS Google ученый
Джейкоб Ф (1977) Эволюция и мастеринг. Science 196: 1161–1166
PubMed Статья CAS Google ученый
Jang-Liaw NH, Tang KL, Hui C-F, Shao K-T (2002) Молекулярная филогения 48 видов стрекоз (Perciformes: Pomacentridae) с использованием последовательностей 12S мтДНК.
Mol Phylogenet Evol 25: 445–454
PubMed Статья CAS Google ученый
Jordan R, Howe D, Juanes F, Stauffer J Jr, Loew E (2004) Ультрафиолетовое излучение увеличивает скорость зоопланктивориев у чувствительных к ультрафиолету цихлид. Afr J Ecol 42: 228–231
Статья Google ученый
Като К., Мисава К., Кума К., Мията Т. (2002) MAFFT: новый метод быстрого совмещения множественных последовательностей, основанный на быстром преобразовании Фурье.Nucleic Acids Res 30: 3059–3066
PubMed Статья CAS Google ученый
Кочер Т.Д. (2004) Адаптивная эволюция и взрывное видообразование: модель рыбы-цихлиды.
Nat Rev Gen 5: 288–298
Статья CAS Google ученый
Konings A (2007) Цихлиды озера Малави в их естественной среде обитания. Cichlid Press, El Paso
Larmuseau MHD, Huyse T, Vancampenhout K, Houdt JKJV, Volckaert FAM (2010) Высокое молекулярное разнообразие гена родопсина у близкородственных бычков: роль зрительных пигментов в адаптивном видообразовании? Mol Phylogenet Evol 55: 689–698
PubMed Статья CAS Google ученый
Loew ER, Lythgoe JN (1978) Экология пигментов конусов костистых рыб.Vis Res 18: 715–722
PubMed Статья CAS Google ученый
org/ScholarlyArticle»>Losey GS, McFarland WN, Loew ER, Zamzow JP, Nelson PA, Marshall NJ (2003) Визуальная биология гавайских коралловых рифовых рыб. I. Зрительная проницаемость и зрительные пигменты. Copeia 2003: 433–454
Статья Google ученый
Lythgoe J (1979) Экология зрения. Clarendon Press, Oxford
Google ученый
Мэддисон В.П., Мэддисон Д.Р. (2008) Мескит: модульная система для эволюционного анализа.Evolution 62 (5): 1103–1118
Статья Google ученый
Manica A (2004) Родительские рыбы меняют свое каннибалистическое поведение в ответ на соотношение затрат и выгод родительской заботы.
Anim Behav 67: 1015–1021
Статья Google ученый
Marshall NJ (2000a) Коммуникация и камуфляж с такими же «яркими» цветами у рифовых рыб. Phil Trans R Soc B 355: 1243–1248
PubMed Статья CAS Google ученый
Marshall NJ (2000b) Визуальная экология окраски рифовых рыб.В: Espmark Y, Amundsen Y, Rosenqvist G (ред.) Сигналы животных. Сигнализация и дизайн сигналов в общении с животными. Tapir, Trondheim, pp 83–120
Google ученый
Маршалл Н.Дж., Дженнингс К., МакФарланд В.Н., Лоу Э.Р., Лоузи Г.С. (2003a) Визуальная биология рыб гавайских коралловых рифов.
II. Цвета гавайских рыб коралловых рифов. Copeia 2003: 455–466
Статья Google ученый
Маршалл Н.Дж., Дженнингс К., МакФарланд В.Н., Лоу Э.Р., Лоузи Г.С. (2003b) Визуальная биология гавайских коралловых рифовых рыб.III. Экологическое освещение и комплексный подход к экологии видения рифовых рыб. Copeia 2003: 467–480
Статья Google ученый
McFarland WN, Loew ER (1994) Ультрафиолетовые визуальные пигменты у морских рыб семейства Pomacentridae. Vis Res 34: 1393–1396
PubMed Статья CAS Google ученый
Мейер А., Кочер Т.Д.
, Басасибваки П., Уилсон А.С. (1990) Монофилетическое происхождение рыб-цихлид из озера Виктория, предполагаемое последовательностями митохондриальной ДНК.Nature 347: 550–553
PubMed Статья CAS Google ученый
Нагаи Х., Тераи Й., Сугавара Т., Имаи Х., Нишихара Х., Хори М., Окада Н. (2011) Обратная эволюция в Rh2 для адаптации цихлид к глубине воды в озере Танганьика. Mol Biol Evol 28: 1769–1776
PubMed Статья CAS Google ученый
Owens GL, Windsor DJ, Mui J, Taylor JS (2009) Рыбий глаз из воды: десять визуальных опсинов у четырехглазой рыбы, Anableps anableps .PLoS One 4: e5970
PubMed Статья Google ученый
org/ScholarlyArticle»>О’Куин К.Э., Хофманн С.М., Хофманн HA, Карлтон К.Л. (2010) Параллельная эволюция экспрессии гена опсина у африканских рыб-цихлид. Mol Biol Evol 27: 2839–2854
PubMed Статья Google ученый
О’Куин К.Э., Смит А.Р., Шарма А., Карлтон К.Л. (2011) Новые доказательства роли гетерохронии в повторяющейся эволюции экспрессии цихлидопсина.Evol Dev 13: 193–203
PubMed Статья Google ученый
Партридж Дж. К., Шанд Дж., Арчер С. Н., Литго Дж. Н., Гронинген-Люибен ВАХМв (1989) Межвидовые различия в визуальных пигментах глубоководных рыб. J Comp Physiol A 164: 513–529
PubMed Статья CAS Google ученый
org/ScholarlyArticle»>Посада Д., Крэндалл К. (1998) ТЕСТ МОДЕЛИ: тестирование модели замещения ДНК.Биоинформатика 14: 817–818
PubMed Статья CAS Google ученый
Quenouille B, Bermingham E, Planes S (2004) Молекулярная систематика стрекоз (Teleostei: Pomacentridae): байесовский филогенетический анализ митохондриальных и ядерных последовательностей ДНК. Mol Phylogenet Evol 31: 66–88
PubMed Статья CAS Google ученый
Randall JE, Allen GR, Steene RC (1996) Рыбы Большого барьерного рифа и кораллового моря.Гавайский университет Press, Гонолулу
Google ученый
Рейли Дж. (2001) Эвтаназия животных, используемых в научных целях. Совет Австралии и Новой Зеландии по уходу за животными в сфере научных исследований и обучения, Аделаида
Google ученый
Rennison DJ, Owens GL, Taylor JS (2012) Дублирование и дивергенция гена опсина у рыб с лучевыми плавниками. Mol Phyl Evol 62: 986–1008
Статья Google ученый
Розен С., Скалецкий HJ (2000) Primer3 в WWW для обычных пользователей и программистов-биологов.В: Krawetz S, Misener S (eds) Bioinformatics Meth Prot: Meth Mol Biol. Humana Press, Totowa, pp 365–386
Google ученый
Seehausen O, Terai Y, Magalhaes IS, Carleton KL, Mrosso HDJ, Miyagi R, Sluijs Ivd, Schneider MV, Maan ME, Tachida H, Imai H, Okada N (2008) Видообразование через сенсорный драйв у цихлид.
Nature 455: 620–626
PubMed Статья CAS Google ученый
Shen Y-Y, Liu J, Irwin DM, Zhang Y-P (2010) Параллельная и конвергентная эволюция гена тусклого зрения Rh2in летучих мышей (отряд: Chiroptera).PLoS One 5: e8838
PubMed Статья Google ученый
Siebeck UE, Marshall NJ (2001) Передача через зрительную среду рыб коралловых рифов — могут ли рыбы коралловых рифов видеть ультрафиолетовый свет? Vis Res 41: 133–149
PubMed Статья CAS Google ученый
Siebeck UE, Marshall NJ (2007) Потенциальное ультрафиолетовое зрение у личинок до заселения и оседлых рифовых рыб — сравнение по 23 семействам.
Vis Res 47: 2337–2352
PubMed Статья CAS Google ученый
Siebeck UE, Wallis GM, Litherland L (2008) Цветовое зрение у рыб коралловых рифов. J Exp Biol 211: 354–360
PubMed Статья CAS Google ученый
Siebeck UE, Parker AN, Sprenger D, Mathger LM, Wallis G (2010) Вид рифовых рыб, которые используют ультрафиолетовые узоры для скрытого распознавания лиц.Curr Biol 20: 1–4
Статья Google ученый
Смит А.Р., Карлтон К.Л. (2010) Аллельная вариация опсинов цихлид Малави: история двух родов. J Mol Evol 70: 593–604
PubMed Статья CAS Google ученый
org/ScholarlyArticle»>Spady TC, Seehausen O, Loew ER, Jordan RC, Kocher TD, Carleton KL (2005) Адаптивная молекулярная эволюция в генах опсинов быстро видоизменяющихся видов цихлид.Mol Biol Evol 22: 1412–1422
PubMed Статья CAS Google ученый
Spady TC, Parry JWL, Robinson PR, Hunt DM, Bowmaker JK, Carleton KL (2006) Эволюция визуальной палитры цихлид посредством онтогенетической субфункционализации массивов генов опсина. Mol Biol Evol 23: 1538–1547
PubMed Статья CAS Google ученый
Sugawara T, Terai Y, Okada N (2002) Естественный отбор гена родопсина во время адаптивной радиации цихлид в восточноафриканских озерах.Mol Biol Evol 19: 1807–1811
PubMed Статья CAS Google ученый
org/ScholarlyArticle»>Sugawara T, Terai Y, Imai H, Turner GF, Koblmüller S, Sturmbauer C, Shichida Y, Okada N (2005) Параллельность аминокислотных изменений в Rh2, влияющих на спектральную чувствительность глубоководных цихлид из озер Танганьика и Малави. Proc Natl Acad Sci USA 102: 5448–5453
PubMed Статья CAS Google ученый
Swofford DL (2003) PAUP *.Филогенетический анализ с использованием экономичности (* и других методов). Sinauer Associates, Сандерленд
Тамура К., Дадли Дж., Ней М., Кумар С. (2007) MEGA4: программа молекулярно-эволюционного генетического анализа (MEGA), версия 4.0. Mol Biol Evol 24: 1596–1599
PubMed Статья CAS Google ученый
org/ScholarlyArticle»>Тан К.Л. (2001) Филогенетические взаимоотношения среди стрекоз (Teleostei: Pomacentridae) по данным митохондриальной ДНК.Copeia 2001: 591–601
Статья Google ученый
Terai Y, Mayer WE, Klein J, Tichy H, Okada N (2002) Влияние отбора на ген длинноволнового опсина (LWS) цихлидных рыб из озера Виктория. Proc Natl Acad Sci USA 99: 15501–15506
PubMed Статья CAS Google ученый
Wald G (1968) Молекулярные основы визуального возбуждения.Nature 219: 800–807
PubMed Статья CAS Google ученый
Ward MN, Churcher AM, Dick KJ, Laver CR, Owens GL, Polack MD, Ward PR, Breden F, Taylor JS (2008) Молекулярные основы цветового зрения у разноцветных рыб: четыре длинноволновой чувствительности (LWS ) опсины у гуппи ( Poecilia reticulata ) определяются аминокислотными заменами в ключевых функциональных сайтах.
BMC Evol Biol 8: 210
PubMed Статья Google ученый
Янг З. (2007) PAML 4: филогенетический анализ методом максимального правдоподобия.Mol Biol Evol 24: 1586–1591
PubMed Статья CAS Google ученый
Янг З., Кумар С., Ней М. (1995) Новый метод вывода наследственных нуклеотидных и аминокислотных последовательностей. Генетика 141: 1641–1650
PubMed CAS Google ученый
Янг З., Вонг WSW, Нильсен Р. (2005) Байесовский эмпирический байесовский вывод аминокислотных сайтов при положительном отборе.Mol Biol Evol 22: 1107–1118
PubMed Статья CAS Google ученый
org/ScholarlyArticle»>Yokoyama S (2000) Молекулярная эволюция зрительных пигментов позвоночных. Prog Retin Eye Res 19: 385–419
PubMed Статья CAS Google ученый
Йокояма С. (2002) Молекулярная эволюция цветового зрения у позвоночных. Ген 300: 69–78
Google ученый
Yokoyama S (2008) Эволюция пигментов тусклого света и цветового зрения.Annu Rev Genomics Hum Genet 9: 259–282
PubMed Статья CAS Google ученый
Йокояма С., Йокояма Р. (1996) Адаптивная эволюция фоторецепторов и зрительных пигментов у позвоночных. Annu Rev Ecol Syst 27: 543–567
Статья Google ученый
org/ScholarlyArticle»>Yokoyama S, Tada T, Zhang H, Britt L (2008) Выявление фенотипических адаптаций: молекулярный анализ белков зрения при тусклом свете у позвоночных.Proc Natl Acad Sci USA 105: 13480–13485
PubMed Статья CAS Google ученый
Чжан Дж., Кумар С. (1997) Обнаружение конвергентной и параллельной эволюции на уровне аминокислотной последовательности. Mol Biol Evol 14: 527–536
PubMed Статья CAS Google ученый
Zwickl DJ (2006) Подходы на основе генетических алгоритмов для филогенетического анализа больших наборов данных биологической последовательности в соответствии с критерием максимального правдоподобия.Техасский университет в Остине
|
Страница не найдена | MIT
Перейти к содержанию ↓- Образование
- Исследование
- Инновации
- Прием + помощь
- Студенческая жизнь
- Новости
- Выпускников
- О MIT
- Подробнее ↓
- Прием + помощь
- Студенческая жизнь
- Новости
- Выпускников
- О MIT
Попробуйте поискать что-нибудь еще! Что Вы ищете? Увидеть больше результатов
Предложения или отзывы?
Снижение тревожности связано с накоплением шести ингибиторов обратного захвата серотонина в сточных водах, подвергшихся воздействию золотой рыбки Carassius auratus.
Академический исследовательский доклад на тему «Экологическая инженерия»НАУЧНЫЕ ОТЧЕТЫ
OPEN Снижение беспокойства связано с накоплением шести ингибиторов обратного захвата серотонина в очищенных сточных водах, подвергшихся воздействию золотой рыбки Carassius auratus
Получено: 12 июня 2017 г. Принято: 19 сентября 2017 г. Опубликовано онлайн: 5 декабря 2017 г.
Д.Б. Д. Симмонс1, Э. С. МакКаллум2, С. Балшин2, Б. Чандрамули 3, Дж. Косгроув3 и Дж. П. Шерри1
Фармацевтические препараты и средства личной гигиены (PPCP) были обнаружены в стоках очистных сооружений (WWTP) и их водосборных бассейнах. Чтобы оценить потенциал сточных вод очистных сооружений для изменения поведения рыб, мы посадили в клетки самцов золотой рыбки (Carassius auratus) в течение 21 дня на трех участках вдоль градиента загрязнения ниже по течению от станции очистки сточных вод, которая сбрасывается в Кутс-Парадайз-Марш на западной оконечности озера Онтарио.
Мы также включили четвертый участок вольера в качестве внешнего ориентира в пределах озера Онтарио в заповеднике гавани Джордан. Затем мы измерили концентрации PPCP и моноаминовых нейромедиаторов в плазме золотой рыбки, содержащейся в клетке, и провели поведенческие анализы, измеряя активность, реакцию вздрагивания и кормление. Мы обнаружили пятнадцать различных PPCP в плазме золотой рыбки, включая шесть ингибиторов обратного захвата серотонина (амитриптилин, циталопрам, флуоксетин / норфлуоксетин, сертралин, венлафаксин и дифенгидрамин).Концентрации серотонина в плазме были значительно выше в плазме рыб, помещенных в клетки ближе к месту сброса сточных вод очистных сооружений. Рыба, содержащаяся в садках вблизи и ниже по течению от стоков КОС, была более смелой, более исследовательской и в целом более активной, чем рыба, помещенная в садки на контрольном участке. Взятые вместе, наши результаты показывают, что рыба ниже по течению от очистных сооружений накапливает PPCP в количествах, достаточных для изменения концентрации нейротрансмиттеров, а также для нарушения экологически значимого поведения.
Стоки очистных сооружений (КОС) являются повсеместным источником антропогенного загрязнения водных экосистем1.Несмотря на то, что появляется все больше литературы, демонстрирующей, что стоки очистных сооружений могут влиять на физиологию и воспроизводство рыб в дикой природе, возможность воздействия стоков очистных сооружений на экологически важное поведение водных организмов широко не рассматривалась. Сточные воды очистных сооружений могут влиять на поведение, поскольку содержат сложную смесь загрязнителей, многие из которых являются эндокринными и неврологически активными2’3. В частности, фармацевтические препараты и средства личной гигиены (PPCP), которые присутствуют в сточных водах очистных сооружений, превратились в одну группу загрязняющих веществ, способных изменить поведение животных.Психотропные препараты специально разработаны для модуляции нейрофизиологии человека, которая часто влияет на поведение. Поскольку биологические мишени этих препаратов сохраняются в костистых рыбах, растет беспокойство по поводу того, что хроническое воздействие PPCP, регулярно обнаруживаемых в стоках очистных сооружений, может повлиять на рыб и других водных позвоночных4.
Использование поведения для оценки последствий хронического воздействия загрязнителей окружающей среды на рыбу набирает обороты в водной токсикологии5,6.Поведенческие реакции могут предложить более чувствительную меру воздействия, вызванного воздействием, по сравнению с традиционными конечными точками, потому что поведение можно изменить задолго до того, как это повлияет на выживаемость или будет обнаружена физиологическая дисфункция7. Кроме того, изменения в поведении можно наблюдать относительно неинвазивным образом. Поведенческие нарушения, вызванные загрязнением, также могут иметь серьезные экологические последствия, влияя на воспроизводство, добычу пищи, риск хищничества и выживание8,9. На сегодняшний день выполнено небольшое количество исследований
2 Отдел исследования водных загрязнителей, Управление водных наук и технологий, Министерство окружающей среды Канады,
Берлингтон, Онтарио, Канада.2 Кафедра психологии, неврологии и поведения, Университет Макмастера, Гамильтон,
ON, Канада.
3Metabolomics Services, SGS AXYS, Сидней, Британская Колумбия, Канада. Переписка и запросы материалов
следует адресовать J.P.S. (электронная почта: [email protected])
показали, что воздействие сточных вод очистных сооружений действительно может изменить поведение рыб в контролируемых лабораторных условиях. Например, Гарсия-Рейеро и др. 10 и Мартинович и др.11 показали, что толстоголовые гольяны-самцы (Pimephales promelas) были менее способны бороться за место гнездования и удерживать место гнездования против неэкспонированных конкурирующих самцов после трехнедельного лабораторного воздействия на 100% сточных вод очистных сооружений. Точно так же самцы трехиглой колюшки (Gasterosteus aculeatus), подвергавшиеся воздействию 50% или 100% сточных вод в течение трех недель, построили меньше гнезд и снизили свое ухаживающее поведение12. Однако 10-недельное воздействие сточных вод очистных сооружений в лаборатории мало повлияло на нерестовое поведение золотой рыбки (Carassius auratus) 13.
Напротив, одно из немногих исследований, проведенных на рыбе в дикой природе, продемонстрировало, что самцы рыбы-москита (Gambusia affinis), собранные ниже по течению от стока очистных сооружений, на самом деле ухаживали за самками больше, чем за самцами рыб, собранных на нетронутых участках14. Поскольку известные цели многих PPCP, присутствующих в сточных водах очистных сооружений, выходят за рамки репродуктивных целей, из этого следует, что сточные воды могут также влиять на поведение, не имеющее значения для репродуктивной пригодности (например, поиск пищи, избегание хищников). Например, у восточной рыбы-комара (Heterandria formosa) снизилась способность плавать и изменилась дневная плавательная активность после 96-часового воздействия стоков очистных сооружений15, а бычок-кругляк (Neogobius melanostomus) был менее агрессивен после 28-дневного воздействия стоков очистных сооружений16.
Таким образом, в качестве заключительной части нашего более обширного исследования, направленного на понимание воздействия сточных вод очистных сооружений и PPCP на дикую рыбу27,18, целью настоящего исследования было оценить, как сточные воды очистных сооружений влияют на поведение рыб.
В то время как лабораторные воздействия не полностью учитывают условия окружающей среды, с которыми рыбы сталкиваются в дикой природе, исследования животных, собранных в полевых условиях, не могут гарантировать конкретную продолжительность воздействия или контролировать другие аспекты жизненного цикла. Для целей мониторинга воздействия на окружающую среду экспериментальное выращивание рыбы в садках на месте обеспечивает полезное решение недостатков, связанных как с лабораторными, так и с полевыми исследованиями, путем создания более реалистичного воздействия, чем то, что возможно в лаборатории, а также контроля некоторых неопределенностей, связанных с исследования диких рыб 19,20.Таким образом, чтобы уменьшить влияние предшествующих загрязняющих или экологических воздействий, присутствующих в болотной воде, которые могли повлиять на диких золотых рыбок, обитающих в райских болотах Кутс (CPM), мы посадили в клетки самцов золотых рыбок, приобретенных в инкубатории, и поместили их в клетки с градиентом воздействие на сток станции очистки сточных вод в Дундасе в пределах CPM (3 участка, CPM1, CPM2, CPM3; рис.
1). Мы также сравнили этих рыб в клетках (вдоль градиента) с рыбами, помещенными в клетки в контрольном месте в гавани Джордан, заповедной зоне в озере Онтарио (JH; рис.1). Чтобы связать изменения в поведении с воздействием очистных сооружений, мы измерили концентрацию отдельных PPCP как в воде, так и в плазме рыб. Мы также измерили концентрации избранных моноаминовых нейротрансмиттеров в плазме рыб в рамках более крупного целевого метаболомного анализа, направленного на установление связи воздействия с физиологическими реакциями, которые могли бы объяснить поведенческие эффекты. Насколько нам известно, это одно из первых исследований, в котором предпринята попытка напрямую связать воздействие сточных вод с очистных сооружений с биоаккумуляцией PPCP и последующими молекулярными и поведенческими изменениями.
Результаты
Поведенческие анализы. Рыбы, подвергшиеся воздействию сточных вод на CPM1 и CPM2, были более активными, и им потребовалось меньше времени, чтобы прийти в норму после вздрагивания, по сравнению с рыбами из контрольного участка (рис.
2). Рыба из этих загрязненных сточными водами участков (CPM1 и CPM2) пересекла больше квадратов сетки (была более активна), чем рыба из контрольного участка (JH), (Отрицательный биномиальный GLM: JH против CPM1, Z = -2,90, p = 0,0037, JH против CPM2, Z = -3,13, p = 0,0017; CPM2 против CPM1, Z = 0.23, p = 0,82). Рыба из садков возле сточных вод также была более исследовательской, чем рыба, содержавшаяся в контрольном участке, занимая больше уникальных квадратов во время испытания активности (линейная модель: JH против CPM1, t = -4,77, p <0,0001; JH против CPM2, t = - 4,38, p <0,0001; CPM2 против CPM1, разница = -0,39, p = 0,70) и провел больше времени в верхней половине водной толщи, зоне высокого риска хищничества в дикой природе (бета-регрессия: JH против CPM1, Z = -2,41, p = 0,016; JH против CPM2, Z = -2,63, p = 0,0087; CPM2 против CPM1, Z = 0.22, p = 0,83). Рыба из всех садков одинаково реагировала на мраморную каплю (тест реакции испуга), бросаясь (47% рыб), замораживаясь (48%) или оставаясь активной (5%), при этом участок не влиял на реакцию испуга.
использовались (тест Фишера, p = 0,15). Однако, испугавшись, рыба с участков возле сточных вод снова начала двигаться и исследовать быстрее, чем рыба с контрольного участка (Линейная модель: JH vs CPM1, t = 2,28, p = 0,028; JH vs CPM2, t = 3,14 , p = 0,003; CPM2 против CPM1, t = -0.86, р = 0,39). Место содержания не влияло ни на скорость кормления, ни на количество попыток кормления (отрицательный биномиальный GLM: JH против CPM1, Z = -0,48, p = 0,63, JH против CPM2, Z = 0,36, p = 0,71; CPM2 против CPM1, Z = -0,84, p = 0,40) или успешное кормление (отрицательный биномиальный GLM: JH против CPM1, Z = -0,69, p = 0,49, JH против CPM2, Z = -1,83, p = 0,066; CPM2 против CPM1, Z = 1,15, p = 0,25). Не было различий между CPM1 и CPM2 ни для одного из тестов поведенческой реакции.
Нейротрансмиттеры в плазме.Из 10 нейромедиаторов, измеренных в плазме (которые были проанализированы в рамках панели метаболомики, использованной для всех образцов плазмы, см. Сопутствующий документ Симмонса и др. 18), на концентрации 6 существенно повлияло расположение клетки (рис. 3). Уровни серотонина были выше в плазме рыб, содержащихся в клетках на участках ближе к оттоку сточных вод (CPM1 и CPM2), по сравнению с рыбами, содержащимися в контрольных участках (JH; ANOVA, F352 = 4,993, p = 0,0041, тест множественного сравнения Тьюки, a = 0,05) . Аспартат и глутамат сильно коррелировали друг с другом (Пирсон r = 0.9204, p <0,0001) и присутствуют в более высоких концентрациях в плазме рыб, содержащихся в клетках близко к выходу сточных вод (CPM1), по сравнению с рыбами, помещенными в садки дальше по течению в CPM2 и CPM3 (ANOVA, F3,95 = 3,379 для аспартата и F3,95 = 3,085). для глутамата p = 0,02 для аспартата и p = для глутамата 0,03, критерий множественного сравнения Тьюки, a = 0,05). Гистамин был ниже в плазме золотой рыбки, содержащейся в клетке на двух участках ниже по течению от сточных вод (CPM1 и CPM2), по сравнению с рыбой на собственно болоте (CPM3) и контрольном участке (JH) (ANOVA, F3,94 = 22.
83, p <0,0001, тест множественного сравнения Тьюки, a = 0,05), как и серин (ANOVA, F3,95 = 5,466, p = 0,0016, тест множественного сравнения Тьюки, a = 0,05), с возрастающей линейной тенденцией по градиенту воздействия (ANOVA, тест на линейный тренд, p = 0,0011). ГАМК была значительно ниже в плазме золотой рыбки на участке CPM2 по сравнению с рыбами, содержащимися в других местах (статистика Краскела-Уоллиса = 15,32, текст множественного сравнения Данна, a = 0,05).
Фармацевтические препараты и средства личной гигиены в плазме.Представленные здесь данные PPCP были извлечены из более крупного набора данных, который подробно рассматривается в сопроводительной рукописи Мьюира и др. 17. Из
4-х полосная трасса Местная дорога
Рис. 1. Места содержания в Кутс-Парадайз-Марш (CPM1, CPM2 и CPM3) и в гавани Джордан (JH), Онтарио, Канада. Базовая карта взята из Атласа Канады (с разрешения Министерства природных ресурсов Канады, http://open.
canada.ca/en/open-government-licence-canada).
127 проанализированных мишеней, 15 PPCP были обнаружены в плазме пойманной золотой рыбки из CPM.Шесть из них были антидепрессантами или их метаболитами (амитриптилин, циталопрам, флуоксетин / норфлуоксетин, сертралин и венлафаксин), 3 были антибиотиками или противомикробными препаратами (эритромицин-h3O, флумекин и сульфаметазин). Другими обнаруженными PPCP были стимулятор (кофеин), репеллент от насекомых (DEET), липид-регулирующий препарат (гемфиброзил), стероидный противовоспалительный препарат (гидрокортизон), медицинский контрастный агент (иопамидол) и бензодиазепин (оксазепам). ), который часто назначают для снятия беспокойства и бессонницы (рис.4). Три из этих PPCP (ДЭТА, гидрокортизон и оксазепам) были также обнаружены у рыб из контрольного участка, Джордан-Харбор. Концентрации большинства ППЦП, обнаруженных в плазме, отражали тенденцию к снижению, которая соответствовала градиенту воздействия на участки клетки в пределах CPM (CPM1> CPM2> CPM3> JH), за исключением амитриптилина, циталопрама, эритромицина-h3O, гемфиброзила, и гидрокортизон.
Средняя концентрация аспартата в плазме золотых рыбок, содержащихся в клетках в каждом месте, положительно коррелировала с концентрацией флумехина (Пирсон r = 0.9659, p = 0,0341) и венлафаксина (r = 0,9572 по Пирсону, p = 0,0428) (таблица 1). Средняя концентрация гистамина в плазме золотой рыбки, содержащейся в клетках в каждом месте, отрицательно коррелировала с концентрацией циталопрама (Пирсон r = -0,9894, p = 0,0106), ДЭТА (Пирсон r = -0,9552, p = 0,0448) и дифенгидрамина (Пирсон r = -0,9872, p = 0,0128) (Таблица 1). Средняя концентрация серина в плазме золотых рыбок, содержащихся в клетках в каждом месте, отрицательно коррелировала с концентрацией эамитриптилина (Пирсон r = -0.9851, p = 0,0149) и ДЭТА (r = -0,9553 Пирсона, p = 0,0447) (таблица 1). Средняя концентрация серотонина в плазме золотой рыбки, содержащейся в клетке в каждом месте, положительно коррелировала с концентрацией
.■ CPM1
□ CPM2
■ JH
Рис. 2. Поведение, отображаемое в анализах, проведенных на содержащихся в клетках золотых рыбках из Cootes Paradise Marsh (CPM) и Jordan Harbor (JH) (n = 48, столбец = средний ответ, столбцы ошибок = 95% ДИ).Различия в уникальных занятых квадратах и времени ожидания движения после вздрагивания оценивались с использованием линейных моделей. Доля времени в верхней половине оценивалась с помощью бета-регрессии, а активность (крестики сетки) — с использованием отрицательных биномиальных обобщенных линейных моделей.
Эамитриптилин (Пирсон r = 0,9809, p = 0,0191), ДЭТА (Пирсон r = 0,9835, p = 0,0165), йопамидол (Пирсон r = 0,9897, p = 0,0193) и сульфаметазин (Пирсон r = 0,9735, p = 0,0265) ( Таблица 1).
Обсуждение
Мы наблюдали, что воздействие сточных вод очистных сооружений изменило поведение самцов золотых рыбок, которые провели всего три недели в клетке в пресноводной среде, получая сточные воды из очистных сооружений.
Эти поведенческие эффекты, вероятно, были частично опосредованы изменениями, наблюдаемыми в уровнях нейромедиаторов в плазме крови подвергшихся воздействию рыб. Золотая рыбка, подвергшаяся воздействию стоков очистных сооружений in situ, имела повышенный уровень серотонина, аспартата и глутамата в плазме, была более активна, более исследовательская и требовала меньше времени для возобновления движения после испуга, чем золотая рыбка, оказавшаяся на контрольном участке, не имеющем этих поступающих стоков очистных сооружений. Эти результаты указывают на снижение тревожности (т. Е. На анксиолитический эффект), что заставляет рыбу вести себя более смело.
Поведенческие эффекты чаще всего наблюдались у рыб во время лабораторного воздействия отдельных фармацевтических препаратов в концентрациях, превышающих уровни, обнаруженные в естественной водной среде21-23. Однако, когда рыба подвергается воздействию сточных вод очистных сооружений в дикой природе, она сталкивается со сложной смесью следов загрязнения.
Эта ситуация еще более усложняется тем, что компоненты смеси PPCP и их концентрации в сточных водах станций очистки сточных вод часто меняются во времени и пространстве24,25.Мало что известно о влиянии хронических микстур фармацевтических смесей на физиологию и поведение рыб, а взаимодействие между лекарственными средствами и загрязняющими веществами может быть сложным (аддитивным, синергическим и / или антагонистическим) 26, поэтому трудно определить причину и -эффект непосредственно на какое-либо одно вещество. В дополнение к PPCP, присутствующим в сточных водах очистных сооружений, реципиентная среда часто содержит множество других загрязнителей от промышленных стоков, унаследованных загрязнителей, поверхностных вод, сельскохозяйственных источников и атмосферного переноса.Несмотря на эти осложнения, необходимы исследования, изучающие эффекты воздействия сточных вод очистных сооружений на месте, чтобы лучше понять реальное воздействие на водные организмы. Также, насколько нам известно, ни одно исследование на сегодняшний день не измеряло биоаккумуляцию PPCP в циркулирующей плазме крови содержащихся в клетке рыб, как мы это делали в настоящем исследовании, хотя были исследования, которые количественно определяли PPCP в плазме27,28 и тканях29,30 дикой рыбы.
(более подробное обсуждение см. в сопроводительной статье Мюира и др. 17). Таким образом, хотя обычно трудно напрямую определить, какие загрязнители, присутствующие в сложной смеси сточных вод очистных сооружений, вызывают изменения в поведении, наш подход в настоящем исследовании помог нам сузить область до нескольких вероятных кандидатов.
Первоначально нам удалось исключить влияние оксазепама и гидрокортизона, потому что оба PPCP биоаккумулировались у золотых рыбок во всех местах содержания в клетках, включая контрольный участок, и не коррелировали со средними концентрациями любого из нейротрансмиттеров — и, таким образом, это маловероятно, что они были бы возбудителями
Аспартат
2000-1
Ol 1500
~ 1000 н
S iooH
Глутамат
Гистамин
Серин
Серотонин
■ CPM1 ■ CPM2 □ CPM3 ■ JH
Рисунок 3.
Средние концентрации нейромедиаторов в плазме у содержащихся в клетках золотых рыбок из Кутс-Парадайз-Марш (CPM1, CPM2 и CPM3) и контрольного участка в Джордан-Харбор (JH). A и B обозначают группы со значимо разными средними значениями (ANOVA, n = 25, p <0,05, множественное сравнение Тьюки, a = 0,05). Полосы ошибок = 95% ДИ. Стрелка указывает на значительный линейный тренд.
наблюдал различия в уровнях нейромедиаторов и поведении. Мы также можем исключить кофеин и гемфиброзил как имеющие поведенческие эффекты, даже если они оба были обнаружены в плазме золотой рыбки, содержащейся в клетке ниже по течению от сточных вод очистных сооружений в CPM, а не на контрольном участке в Джордан-Харбор.В то время как кофеин оказывает стимулирующее действие на людей, кофеин, как известно, оказывает анксиогенное действие на рыбок данио (Danio rerio), что обычно приводит к более осторожному и менее исследовательскому поведению31,32. Однако в настоящем исследовании мы наблюдали анксиолитические эффекты,
, и, таким образом, мы предположили, что воздействие кофеина вряд ли вызвало бы изменения в поведении в
.
наша золотая рыбка. Добавляя дополнительный вес к этому предположению, мы не обнаружили корреляции между кофеином и средними концентрациями нейротрансмиттеров в плазме.Гемфиброзил классифицируется как фибратный препарат, который снижает уровень циркулирующих липидов (триглицеридов и липидов низкой плотности) за счет активации рецептора альфа-
, активирующего пролифератор пероксисом.(PPARa), который затем вызывает повышенный синтез липопротеинлипазы33. Исследования показали, что гемфиброзил может снижать синтез андрогенов in vitro34 и in vivo35, а также снижает активность при плавании36. Однако мы наблюдали повышенную плавательную активность у рыб, которые были частью настоящего исследования, и не наблюдали корреляции между нейротрансмиттерами и концентрацией гемфиброзила в плазме.Таким образом, мы пришли к выводу, что воздействие гемфиброзила, вероятно, не было фактором, влияющим на поведение.
Am ¡triptyIine
Кофеин
дюйма 0,15
1 0,10
3 o.
oo
Циталопрам
0,25 0,20 0,15 0,10 0,05 0,00
0,6 0,4
Дифенгидрамин
Эритромицин-h30
1.5-1 1,0 0,5 0,0
Флумеквин
1,5- | 1,0 0,5 0,0
Флуоксетин
0,20-, 0,15 0,10 0,050,00
Гемфиброзил
Гидрокортизон
25-й 20 15 105
лопамидол
1.0-, 0.8 0.60.40.2 o.o-L
Оксазепам
Ü 0,15- |
3 о.oo
Сертралин
0,15-j 0,100,05
3 0,00
Сульфаметазин
■ g 0,20-, ■ f 0,15
2 0,10-1
§ 0,05 c
3 o.
oo
Венлафаксин
□ CPM2
□ CPM3
Рис. 4. Фармацевтические препараты, обнаруженные в плазме самцов золотой рыбки, содержащихся в клетке, после 21 дня размещения в Cootes Paradise Marsh (CPM1, CPM2 и CPM3) и эталонном участке, Jordan Harbor (JH) (каждая полоса представляет собой одно значение из объединенной плазмы 25 золотых рыбок).Данные, представленные на этом рисунке, взяты из сопутствующей рукописи Мьюира и др. 17.
Флумехин достоверно положительно коррелировал с аспартатом; сульфаметазин значительно положительно коррелировал с серотонином, в то время как уровни эритромицина-h3O не коррелировали с концентрацией какого-либо нейромедиатора. Насколько нам известно, в настоящее время не существует опубликованных исследований, описывающих влияние антибиотиков и противомикробных препаратов на поведение рыб (или на поведение животных в целом).Точно так же уровни иопамидола достоверно положительно коррелировали с концентрациями серотонина в плазме золотой рыбки, но нет информации о потенциальных поведенческих или токсикологических эффектах иопамидола, хотя есть косвенные доказательства того, что хронический
Коэффициент корреляции Пирсона r значение p
Аспартат ГАМК Глутамат Гистамин Серин Серотонин Аспартат ГАМК Глутамат Гистамин Серин Серотонин
EAмитриптилин 0.
3465 -0,0359 0,2374 -0,8390 -0,9851 0,9809 0,6535 0,9641 0,7626 0,1610 0,0149 0,0191
Кофеин 0,8506 0,5832 0,7970 -0,7159 -0,6817 0,8701 0,1494 0,4168 0,2030 0,2841 0,3183 0,1299
Циталопрам 0,4167 -0,1165 0,2721 -0,9894 -0,9354 0,9274 0,5833 0,8835 0,7279 0,0106 0,0646 0,0726
ДЭТА 0,5003 0,0257 0,3736 -0,9552 -0,9553 0,9835 0,4997 0,9743 0,6264 0,0448 0,0447 0,0165
Дифенгидрамин 0.5459 0,0324 0,4118 -0,9872 -0,9088 0,9462 0,4541 0,9676 0,5882 0,0128 0,0912 0,0538
Эритромицин-h3O 0,0068 0,1584 0,0361 -0,0206 -0,4586 0,4691 0,9932 0,8416 0,9639 0,9794 0,5414 0,5309
Флумеквин 0,9659 0,7950 0,9476 -0,5418 -0,4168 0,6706 0,0341 0,2050 0,0524 0,4582 0,5832 0,3294
E Флуоксетин 0,7704 0,3404 0,6689 -0,9080 -0,7964 0,9245 0,2296 0,6596 0,3311 0,0920 0,2036 0,0755
Гемфиброзил 0.3044 0,0995 0,2424 -0,6084 -0,8788 0,8988 0,6956 0,9005 0,7576 0,3916 0,1212 0,1012
Гидрокортизон -0,2168 -0,1760 -0,2278 -0,1385 -0,5993 0,5130 0,7832 0,8240 0,7722 0,8615 0,4007 0,4870
Иопамидол 0,5970 0,1352 0,4780 -0,9490 -0,9181 0,9807 0,4030 0,8648 0,5220 0,0510 0,0819 0,0193
Оксазепам 0,4621 0,5238 0,5096 0,2035 0,6348 -0,4510 0,5379 0,4762 0,4904 0,7965 0,3652 0,5490
Сертралин 0.
8920 0,6261 0,8414 -0,7041 -0,6311 0,8349 0,1080 0,3739 0,1586 0,2959 0,3689 0,1651
Сульфаметазин 0,6926 0,3319 0,6048 -0,8443 -0,8596 0,9735 0,3074 0,6681 0,3952 0,1557 0,1404 0,0265
Венлафаксин 0,9572 0,7012 0,9144 -0,6620 -0,5090 0,7404 0,0428 0,2988 0,0856 0,3380 0,4910 0,2596
Таблица 1. Матрица корреляции для PPCP и средних концентраций нейромедиаторов, обнаруженных в плазме золотой рыбки. Коэффициенты корреляции Пирсона, выделенные жирным шрифтом, значимо коррелировали (p-значение <0.05).
Воздействие этой молекулы может повлиять на ось гипоталамус-гипофиз-щитовидная железа37. ДЭТА также значительно положительно коррелировал с серотонином и значимо отрицательно коррелировал с гистамином и серином. ДЭТА обычно считается токсичным для рыб только в концентрациях, в тысячи раз превышающих уровни, наблюдаемые в пресных водах38, и не было никаких контролируемых поведенческих исследований ДЭТА с рыбами.
В отсутствие дополнительной информации трудно определить, могли ли флумехин, сульфаметазин, иопамидол и / или ДЭТА быть возбудителями наблюдаемых нами поведенческих изменений.Мы рекомендуем устранить эти пробелы в знаниях в будущих исследованиях поведения.
Из оставшихся шести PPCPs, которые были обнаружены в их плазме, самцы золотой рыбки накапливали пять антидепрессантов (амитриптилин, флуоксетин, включая метаболит норфлуоксетин, циталопрам, сертралин и венлафаксин) в плазме, когда они находились в клетках ближе к водостоку очистных сооружений. Уровни амитриптилина и венлафаксина в плазме достоверно положительно коррелировали со средними концентрациями аспартата и серотонина соответственно.Флуоксетин, циталопрам и сертралин являются селективными ингибиторами обратного захвата серотонина (СИОЗС), а амитриптилин и венлафаксин — селективными ингибиторами обратного захвата серотонина и норэпинефрина (ИОЗСН). Считается, что эти соединения увеличивают концентрацию серотонина, предотвращая его обратный захват из синаптической щели транспортером серотонина (SERT) 39.
В качестве мишеней для лекарств SERT относительно хорошо сохраняются у позвоночных, включая рыб50. Это предполагает, что СИОЗС, предназначенные для использования человеком, будут иметь аналогичные механизмы действия на костистых рыб.Подтверждая мнение о том, что СИОЗС могли вызывать изменения в поведении наших золотых рыбок, у рыб, содержащихся в клетках на участках, подверженных воздействию стоков очистных сооружений, наблюдалось повышение уровня серотонина в плазме, что указывает на вероятное ингибирование захвата серотонина серотонинами. В нескольких исследованиях также наблюдалось повышение активности и анксиолитические эффекты у рыб во время лабораторного воздействия СИОЗС, что подтверждает наши наблюдения — например; Рыбки данио, подвергшиеся воздействию флуоксетина, проводили больше времени наверху резервуара и были более активными41.У гуппи (Poecilia reticulate), подвергшихся воздействию флуоксетина, время реакции на хищника было отложено у самцов и самок42, а толстоголовые гольяны (Pimephales promelas), подвергшиеся воздействию флуоксетина, были более исследовательскими в новой среде40.
Точно так же толстоголовые гольяны, подвергшиеся воздействию сертралина, были более активными и с меньшей вероятностью искали убежище в ярко освещенной среде43. Трехиглая колюшка (Gasterosteus aculeatus) была более активной и исследовательской при воздействии циталопрама23. Гуппи Эндлера (Poecilia wingei) были более склонны перемещаться в новой среде после воздействия циталопрама44.Венлафаксин был идентифицирован как нейроэндокринный разрушитель45, который может изменять избегание хищников46 и поведение хищников47,48. На момент проведения этого исследования опубликованных данных об амитриптилине и поведении рыб нет. Тем не менее, наблюдения в настоящем исследовании отражают логическую предпосылку, что СИОЗС и СИОЗСН могут влиять на поведение рыб, и подтверждаются повышенными уровнями серотонина в плазме, а также отражают поведенческие результаты других опубликованных исследований.
Золотая рыбка в настоящем исследовании также накапливала больше антигистаминного дифенгидрамина, когда помещалась в клетку ближе к выходу сточных вод.
Как и ожидалось, концентрации гистамина в плазме отрицательно коррелировали с накопленными уровнями дифенгидрамина. Это относится к поведению, потому что дифенгидрамин имеет несколько способов действия; как обратный агонист рецептора гистамина (h2) 49, антагонист мускариновых рецепторов ацетилхолина (mAChR50) и как ингибитор обратного захвата SERT51. У рыб воздействие дифенгидрамина в лаборатории оказало в значительной степени успокаивающее действие на поведение. Карась (Carassius carassius) подвергается воздействию> 21.7 ¡аг / л показывает подавленную скорость подачи и уменьшенное движение в открытом резервуаре40,52. Передвижение было снижено у рыбок данио, подвергшихся воздействию гораздо более высоких (> 1000x) номинальных концентраций 53 дифенгидрамина43. Berninger et al.44,54 также обнаружили, что дифенгидрамин снижает пищевое поведение у толстоголовых гольянов при воздействии> 5,6 мкг / л, но это изменение поведения не влияет на рост во время субхронического воздействия. В настоящем исследовании уровни воздействия были на порядок ниже, чем в лабораторных условиях, описанных выше, что может объяснить, почему седативные эффекты дифенгидрамина отсутствовали у нашей золотой рыбки.
Однако, поскольку мы наблюдали пониженный уровень гистамина у золотых рыбок, уровни дифенгидрамина в плазме должны были быть достаточно высокими, чтобы способствовать обратному
агонистических эффектов на рецептор h2. Кроме того, присутствие дифенгидрамина в смеси с другими СИОЗС, как мы знаем, имеет место в случае с золотой рыбкой, содержащейся в клетке рядом с очистными сооружениями в настоящем исследовании, может иметь аддитивный эффект, усиливая ингибирование обратного захвата серотонина различными изоформами SERT55,56. Таким образом, возможно, что уровни дифенгидрамина, которые испытывала наша золотая рыбка in situ, оказали аддитивное влияние на поведение, связанное с серотонином.
Результаты настоящего исследования пополняют растущий объем литературы, демонстрирующей, что сточные воды очистных сооружений влияют на поведение рыб. В ранее опубликованных исследованиях сообщалось о снижении такого поведения, как защита территории, строительство гнезд, ухаживание и плавание, когда рыба подвергалась воздействию стоков очистных сооружений10-12,15.
В большинстве этих исследований отмечены различия в поведении самцов и самок рыб, и на основании индукции биомаркера гормона и / или вителлогенина (Vtg) они пришли к выводу, что снижение репродуктивного поведения самцов рыб, вероятно, связано с присутствием эстрогенов в окружающей среде. .Однако в настоящем исследовании мы не наблюдали индукцию Vtg у самцов золотой рыбки, помещенных в садки28, и поэтому мы не подозреваем, что эстрогены окружающей среды, которые могут присутствовать в сточных водах, поступающих в CPM, были в достаточно высоких концентрациях, чтобы играть роль в поведенческих изменениях. эффекты мы наблюдали. Кроме того, золотые рыбки менее чувствительны к эстрогенам окружающей среды и эстрогенным выбросам13. Вместо этого сточные воды очистных сооружений подвергли воздействию золотых рыбок в настоящем исследовании были более активными и исследовательскими, что аналогично наблюдениям Saaristo et al.14, который показал, что самцы рыбы-москита, собранные в дикой природе возле выхода очистных сооружений, более активно ухаживали за самками, чем за самцами в контрольном месте, даже несмотря на то, что уровни экологических эстрогенов и андростендиона не различались в обоих местах.
В нашем исследовании мы наблюдали повышенные концентрации серотонина у рыб, содержащихся в клетках ближе к стокам очистных сооружений, и, хотя мы не анализировали репродуктивное поведение, не наблюдали влияния на соматический индекс гонад18 и не обнаружили доказательств нарушения репродуктивной эндокринной системы18, серотонин непосредственно участвует в воспроизводстве рыб57.Считается, что серотонин стимулирует высвобождение гонадотропин-рилизинг-гормона (и гонадотропина), увеличивает созревание гонад и модулирует репродуктивное и социальное поведение рыб57. Индукция Vtg флуоксетином SSRI ранее наблюдалась у золотых рыбок, которая была усилена в смеси с этинилэстрадиолом58, демонстрируя потенциал серотонина для взаимодействия с репродуктивной функцией. Таким образом, возможно, что повышенный уровень серотонина, который мы измерили у наших золотых рыбок, может повлиять на их репродуктивное поведение и развитие.В нашей экспериментальной схеме использовались только самцы, а рыба подвергалась воздействию в течение трех недель в период нереста: она не была разработана для выявления изменений репродуктивного поведения.
В будущем было бы полезно расширить текущую стратегию содержания в клетках, включив как самок, так и самцов, чтобы мы могли наблюдать, влияет ли вода в Кутс-Парадайз на поведение размножающихся пар.
Выводы
После трех недель воздействия в Cootes Paradise Marsh, большом водно-болотном угодье, куда поступают сточные воды очистных сооружений, мы наблюдали накопление PPCPs от следовых уровней в воде в плазме рыб в концентрациях, которые были достаточными для изменения уровней нейротрансмиттеров и поведенческих реакций.CPM — это уникальное место, где в водозаборе болота преобладают сточные воды очистных сооружений, особенно летом, когда выпадает мало осадков. Таким образом, CPM предлагает идеальную возможность для изучения воздействия сточных вод очистных сооружений. Хотя CPM не может быть репрезентативным для всех реципиентов, водосборы с преобладанием сточных вод распространены во всем мире; они представляют собой «наихудший» сценарий оценки воздействия сбросов сточных вод59.
Наша конструкция клетки с учетом градиента воздействия, включая биоаналитический анализ PPCP и моноаминовых нейромедиаторов, позволила нам связать конечные точки поведения с воздействием.Сточные воды очистных сооружений могут также содержать другие загрязнители, такие как пестициды, которые в нашем исследовании не оценивались и которые могли повлиять на молекулярные и поведенческие реакции. Однако наши результаты убедительно указывают на то, что комбинированные эффекты нескольких PPCP, присутствующих в сточных водах очистных сооружений, вероятно, повлияют на популяции диких рыб, уменьшая их беспокойство и приводя к изменению плавательной активности и реакции на них.
Методы
Размещение золотой рыбки в клетке.Это исследование соответствовало рекомендациям Канадского совета по уходу за животными и было одобрено Комитетом по уходу за животными GLLFAS / WSTD (правительство Канады) и Комитетом по этике исследований животных McMaster. Мы использовали только один пол золотых рыбок, чтобы исключить пол как мешающий фактор: мы специально выбрали золотых рыбок-самцов, чтобы проверить потенциальное эстрогенное влияние очистных сооружений.
Мы приобрели самцов золотых рыбок у AQUAlity Tropical Fish Wholesale, Inc. (Миссиссауга, Онтарио) и впоследствии поместили их в рециркуляционные резервуары объемом 1500 л с установленным потоком из расчета 1 л / грамм рыбы в день в Центре исследования водной флоры и фауны (ALRF — Environment Canada and Изменение климата, Берлингтон, Онтарио) в течение 2 недель.По прибытии в лабораторию мы лечили рыбу формалином и кормили ее формулой Northfin Goldfish (Canadian Aquatic Feeds Ltd, Торонто) в количестве 2% от расчетной массы тела в день. Мы построили клетки из пластиковых сумок (сумка с шарнирным верхом Rubbermaid, 114 л, полипропилен, размеры: 81 x 51,4 x 44,5 см) с просверленными отверстиями диаметром 5/8 дюйма для водообмена, а также добавили оборудование из нержавеющей стали и вспененные поплавки, которые позволяют нам установить клетку на высоте 12 дюймов над осадком. Мы разместили 13 рыб на клетку и еженедельно посещали клетки, чтобы добавить рыбе 20 г корма на клетку.Клетки, содержащие золотых рыбок, были размещены на 21 день с 25/26 июня 2014 г.
по 16/17 июля 2014 г. У нас было по пять повторяющихся клеток на каждом из наших четырех участков (см. Карту расположения клеток на рис. 1). Три из этих площадок находились на уклоне вдоль шлейфа выхода водоочистных сооружений Дундаса: CPM1 на канале Дежарден (530 м от выхода, ближайший), CPM2 у Западного пруда (975 м от выхода, ниже по течению), и CPM3 на площадке McMaster Landing. (3850 м от устья, самое дальнее). Наш четвертый объект, Jordan Harbour (JH), служил ориентиром и находился за пределами водораздела CPM (50 км по суше).На каждом участке мы измеряли температуру воды, pH, растворенный кислород и проводимость (многопараметрический зонд YSI, серия 6600) в двух экземплярах в дни 1, 14 и 21 периода воздействия (см. Таблицу S1).
Коллекция плазмы золотой рыбки. Мы собирали плазму, как описано ранее Simmons et al. 8.
Анализ плазменных фармацевтических препаратов и средств личной гигиены. Мы следовали ранее описанным методам, описанным Muir et al.
17 для обнаружения PPCP в плазме золотой рыбки.
Нейротрансмиттеры и родственные метаболиты. Мы измерили (DL-аспартат, DL-DOPA, дофамин, гамма-аминомасляную кислоту (GABA), DL-глутамат, глицин, гистамин, фенилэтиламин, серин и серотонин в плазме золотой рыбки с помощью LC-MS / MS (SGS AXYS, Axyomics, Сидни BC). Мы использовали внутренние стандарты, как описано в ранее опубликованном методе60 с некоторыми изменениями, которые подробно описаны в Simmons et al.18.
Поведенческие анализы. Мы перевезли золотых рыбок живыми из установленных садков на трех полевых участках (N = 16 рыб на участок выращивания) в Университет Макмастера для проведения поведенческих анализов (рыбы из CPM3 не тестировались из-за ограничений по времени на сбор поведенческих данных).Оставшуюся рыбу использовали для анализов PPCP, метаболома и протеома. В лаборатории мы поместили рыбу в клетку в резервуары емкостью 150 л (h54 см x W90 см x D38 см), снабженные субстратом из природного гравия и статическим фильтром обновления (Aquaclear).
Мы провели поведенческий анализ примерно через 18 часов после транспортировки, чтобы обеспечить восстановление после обработки и акклиматизацию в лаборатории51,61. Мы провели три поведенческих анализа: 1) анализ активности, 2) анализ реакции вздрагивания (который моделировал событие хищничества) и 3) анализ кормления.Мы регистрировали все поведение из-за вертикального непрозрачного барьера высотой 1,8 м, который блокировал движения наблюдателя и ограничивал нарушения во время оценки поведенческих проб. Мы провели все три анализа в испытательном резервуаре объемом 45 л (h43 см x W51 см x D28 см), оборудованном субстратом из природного гравия и статическим обновляющим фильтром (Рисунок S1). Мы наложили сетку 2х3 на переднюю часть аквариума и сетку 2х2 на каждом конце аквариума, чтобы отслеживать активность основных рыб в трех измерениях, подробно описанных ниже.Кроме того, мы закрепили 75-сантиметровую трубку (диаметром 3 см), которая заканчивалась над центром верхней части испытательного резервуара.
Трубка позволяла нам пугать рыбу, используя мрамор, или последовательно вводить корм, не беспокоя экспериментатора. Мы начали испытания, когда рыба в клетке была переведена из резервуара для содержания в экспериментальный резервуар, а затем каждой рыбе было дано 20 минут, чтобы прийти в себя после обработки, транспортировки и акклиматизироваться в резервуаре для тестирования.
Мы последовательно провели три поведенческих анализа.Продолжительность каждого анализа составляла 5 минут с 15-минутным перерывом между анализами. Во время анализа активности мы регистрировали каждый раз, когда фокусная рыба входила в новый квадрат сетки; это произошло, когда более половины тела и головы рыбы оказались в новом квадрате. По этим оценкам мы оценили разведку как количество уникальных квадратов, занятых рыбой, и долю введенных квадратов, которые находились в верхней и нижней половине водной толщи. Для анализа реакции вздрагивания мы выпустили шарик (1.Диаметром 5 см) вниз по трубке, чтобы приземлиться в центре резервуара. Это создает всплеск, имитирующий воздушное нападение хищников, и мы измерили реакцию рыбы на это возмущение62. Мы записали поведенческую реакцию каждой рыбы на испуг (например, оставалась активной, замерзла или метнулась), а также количество секунд, которое потребовалось рыбе, чтобы возобновить движение и перейти в новый квадрат сетки. В нашем последнем анализе мы измерили скорость кормления, выпустив по трубке 10 гранул корма для рыб (Northfin) в аквариум.Рыбы были знакомы с этим кормом, поскольку их кормили в лаборатории до помещения в клетки и во время периода содержания в них. Мы подсчитывали количество попыток кормления (выпады и захваты пищи) и количество успешных попыток кормления (захват и потребление).
После тестирования поведения мы удалили рыбу из резервуара для тестирования, в резервуар подменили воду на 50%, а все оставшиеся кормовые гранулы были удалены. Затем мы усыпили рыбу передозировкой бензокаина (0.015% раствор, Sigma Aldrich) и заморозили их при -20 ° C до последующего вскрытия.
После оттаивания мы измерили стандартную длину (от рыла до хвостового стебля) штангенциркулем с точностью до 0,01 см. Затем мы измерили массу всего тела и гонад на цифровых весах с точностью до 0,001 г (Ohaus Adventurer Pro). Рыбы, использованные для поведенческих анализов, не различались по массе тела (ANOVA: F2,43 = 0,24, p = 0,78) или стандартной длине (ANOVA: F2,43 = 0,42, p = 0,66) между участками воздействия в клетках.
Статистический анализ.Для поведенческих тестов мы провели статистический анализ с использованием R (версия: 3.2.3, R Core Team 2015). Во всех анализах место клетки было включено как фиксированный фактор. Мы проанализировали количество пересечений сетки (наша мера активности), количество попыток кормления и количество успешных попыток кормления, используя отрицательные биномиальные обобщенные линейные модели, подходящие для чрезмерно диспергированных данных подсчета. Мы проанализировали долю времени, в течение которого рыба находилась в верхней половине водяного столба во время нашего анализа активности, используя бета-регрессию63.
Мы проанализировали количество уникальных квадратов, занятых во время анализа активности, и задержку начала движения рыб после испуга с помощью линейных моделей. Мы проанализировали категориальную поведенческую реакцию рыбы на испуг (т. Е. Дротик, замирание) с помощью точного теста Фишера. Во всех тестах не было исключено ни одной рыбы, что дает каждому анализу размер выборки N = 48. Для нейромедиаторов и связанных метаболитов мы оценили значимость значений кратного изменения, используя дисперсионный анализ (ANOVA) с апостериорным тестом LSD Фишера в Metaboanalyst 3 .0 с настройками по умолчанию. Для сравнения групп мы провели ANOVA, а затем тест множественного сравнения Тьюки, но когда данные не соответствовали предположениям ANOVA, мы выполнили тест Крускала-Уоллиса, а затем тест множественного сравнения Данна. Фигуры были построены с помощью Graphpad Prism 5.01.
Доступность данных. Все данные, полученные или проанализированные в ходе этого исследования, включены в эту опубликованную статью и в дополнительную информацию
.
Список литературы
1.Марго, Дж., Росси, Л., Барри, Д. А. и Холлигер, К. Обзор судьбы микрозагрязнителей на очистных сооружениях. Wiley Interdiscip. Ред. Вода 2, 457-487 (2015).
2. Колпин Д. В. и др. Фармацевтические препараты, гормоны и другие органические загрязнители сточных вод в водотоках США, 1999-2000 годы: национальная разведка. Environ. Sci. Technol. 36, 1202-1211 (2002).
3. Блэр, Б. Д., Краго, Дж. П., Хедман, К. Дж. И Клапер, Р. Д. Фармацевтические препараты и средства личной гигиены, обнаруженные в Великих озерах в концентрациях, превышающих опасные для окружающей среды.Chemosphere 93, 2116-2123 (2013).
4. Гуннарссон, Л., Яухиайнен, А., Кристианссон, Э., Нерман, О., Ларссон, Д. Г. Дж. Эволюционная консервация лекарственных мишеней для человека в организмах, используемых для оценки экологических рисков. Environ. Sci. Technol. 42, 5807-5813 (2008).
5.
Литтл Э. и Фингер С. Э. Плавание как индикатор сублетальной токсичности для рыб. Environ. Toxicol. Chem. 9, 13-19 (1990).
6.Бейли, М. Основы поведения: использование передвижения животных в поведенческой экотоксикологии. Behav. Brain Res., 211-230 (2002).
7. Зала, С. М. и Пенн, Д. Дж. Ненормальное поведение, вызванное химическим загрязнением: обзор доказательств и новые проблемы. Anim. Behav. 68, 649-664 (2004).
8. Brodin, T. et al. Экологические эффекты фармацевтических препаратов в водных системах — воздействие через поведенческие изменения. Филос. Пер. R. Soc. B-Biol. Sci. 369 (2014).
9. Скотт, Г. Р., Сломан, К. А. Влияние загрязнителей окружающей среды на сложное поведение рыб: интеграция поведенческих и физиологических показателей токсичности. Акват. Toxicol. 68, 369-392 (2004).
10. Garcia-Reyero, N. et al. Поведенческие и геномные воздействия сточных вод на толстоголового гольяна.
Акват. Toxicol. 101, 38-48 (2011).
11. Мартинович Д., Хогарт В. Т., Джонс Р. Э. и Соренсен П.W. Экологические эстрогены подавляют гормоны, поведение и репродуктивную способность у самцов толстоголовых гольянов. Environ. Toxicol. Chem. 26, 271-278 (2007).
12. Себире, М., Кациадаки, И., Тейлор, Н. Г. Х., Маак, Г. и Тайлер, С. Р. Кратковременное воздействие очищенных сточных вод изменяет репродуктивное поведение трехиглой колюшки (Gasterosteus aculeatus). Акват. Toxicol. 105, 78-88 (2011).
13. Шенфус, Х. Л., Левитт, Дж. Т., Ван дер Краак, Г.& Соренсен, П. В. Десятинедельное воздействие очищенных сточных вод оказывает относительно незначительное, переменное влияние на репродуктивное поведение и производство спермы у золотых рыбок. Environ. Toxicol. Chem. 21, 2185-2190 (2002).
14. Saaristo, M. et al. Изменение репродуктивного поведения самцов рыб-москитов, живущих ниже по течению от очистных сооружений.
Акват. Toxicol. 149, 58-64 (2014).
15. Мелвин, С. Д., Бак, Д. Р., Фаббро, Л. Д. Характер дневной активности как чувствительный поведенческий результат у рыб: эффект кратковременного воздействия очищенных сточных вод и сублетальной смеси PPCP.J. Appl. Toxicol. 36, 1173-1182 (2016).
16. McCallum, E. S. et al. Воздействие сточных вод влияет на поведение рыб и поглощение фармацевтических препаратов тканями. 605-606, 578-588 (2017).
17. Muir, D. et al. Биоаккумуляция фармацевтических препаратов и химикатов в продуктах личной гигиены в рыбе, подвергшейся воздействию сточных вод в городских водно-болотных угодьях. Sci. Реп. Https://doi.org/10.1038/s41598-017-15462-x (2017).
18. Симмонс, Д.и другие. Измененная экспрессия метаболитов и белков у диких и содержащихся в клетках рыб, подвергшихся воздействию сточных вод на месте. Sci. Реп. Https://doi.org/10.1038/s41598-017-12473-6 (2017).
19.
Palace, V. P. et al. Садковое выращивание мелкой рыбы как альтернативный метод мониторинга воздействия на окружающую среду (EEM). Качество воды. Res. J. Can. 40, 328-333 (2005).
20. Оикари, А. Методы садкования для воздействия на рыбу химических загрязнителей в полевых условиях. Акват. Toxicol.78, 370-381 (2006).
21. Ансай, С., Хосокава, Х., Маэгава, С. и Киношита, М. Хроническое лечение флуоксетином вызывает анксиолитические реакции и изменяет социальное поведение в медаке, Oryzias latipes. Behav. Brain Res. 303, 126-136 (2016).
22. de Abreu, M. S. et al. Диазепам и флуоксетин снижают стрессовую реакцию у рыбок данио. PLoS One 9 (2014).
23. Kellner, M. et al. Циталопрам, передаваемый через воду, обладает анксиолитическим действием и увеличивает двигательную активность трехиглой колюшки (Gasterosteus aculeatus).Акват. Toxicol. 173, 19-28 (2016).
24. Schoenfuss, H.
L. et al. Сложные смеси, сложные ответы: оценка фармацевтических смесей с использованием полевых и лабораторных подходов. Environ. Toxicol. Chem. 35, 953-965 (2016).
25. Paxeus, N., Bester, K. & El-Taliawy, H. Временные колебания и тенденции загрузки широко используемых фармацевтических препаратов на крупные очистные сооружения в Швеции, тематическое исследование (Ryaverket). Water Sci. Technol. 73, 3049-3056 (2016).
26. Бакхаус, Т. Лекарства, встряхиваемые и перемешиваемые: критический обзор экотоксикологии фармацевтических смесей. Филос. Пер. R. Soc. B-Biol. Sci. 369 (2014).
27. Scott, W. C. et al. Прогнозируемые и наблюдаемые превышения терапевтических доз ионизируемых фармацевтических препаратов в плазме рыб из городских прибрежных систем. Environ. Toxicol. Chem. 35, 983-995 (2016).
28. Zhao, J. L. et al. Тканевая биоаккумуляция человеческих и ветеринарных антибиотиков в желчи, плазме, печени и мышцах диких рыб из высоко урбанизированного региона.
Environ. Загрязнение. 198, 15-24 (2015).
29. Уэрта Б., Родригес-Мозаз С. и Барсело Д. Фармацевтические препараты в биоте водной среды: аналитические методы и последствия для окружающей среды. Анальный. Биоанал. Chem. 404, 2611-2624 (2012).
30. Ду Б., Перес-Уртадо П., Брукс Б. В. и Чамблисс К. К. Оценка метода тандемной масс-спектрометрии с жидкостной хроматографией с изотопным разбавлением для фармацевтических препаратов на рыбе. J. Chromatogr. А 1253, 177–183 (2012).
31. Максимино, К., да Силва, А. В. Б., Гувейя, А., Геркулано, А. М. Фармакологический анализ скототаксиса у рыбок данио (Danio rerio). Прог. Neuropsychopharmacol. Биол. Psychiatry 35, 624-631 (2011).
32. Richendrfer, H., Pelkowski, S.D., Colwill, R.M. & Creton, R. На краю: Фармакологические доказательства поведения, связанного с тревогой, у личинок рыбок данио. Behav. Brain Res. 228, 99-106 (2012).
33.
Gemfibrozil, www.Drugbank.ca/drugs/DB01241 (2017).
34. Фернандес, Д., Шнелл, С. и Порте, С. Могут ли фармацевтические препараты влиять на синтез активных андрогенов у самцов рыб? Исследование in vitro. Mar. Pollut. Бык. 62, 2250-2253 (2011).
35. Mimeault, C. et al. Регулятор липидов человека, гемфиброзил, биоконцентрирует и снижает уровень тестостерона у золотой рыбки Carassius auratus. Акват. Toxicol. 73, 44-54 (2005).
36. Энрикес, Дж.F. et al. Эффекты гемфиброзила, регулятор липидов: токсикологические и поведенческие аспекты. Акват. Toxicol. 170, 355-364 (2016).
37. Parravicini, E. et al. Йод, функция щитовидной железы и младенцы с очень низкой массой тела при рождении. Pediatrics 98, 730-734 (1996).
38. Sun, H.Q. et al. Оценка острой токсичности и экологического риска бензофенона и N, N-диэтил-3-метилбензамида в продуктах личной гигиены. Int. J. Environ. Res. Общественное здравоохранение 13 (2016 г. ).
39. Прескорн, С., Росс, Р. и Станга, К. Ю. в Антидепрессанты: прошлое, настоящее и будущее (ред. С. Прескорн, Дж. П. Файнер, С. Ю. Станга и Р. Росс) 242-262 (Springer-Verlag, 2004).
40. Margiotta-Casaluci, L. et al. Количественная межвидовая экстраполяция между людьми и рыбами: случай антидепрессанта флуоксетина. PLoS One 9, e110467 (2014).
41. Maximino, C. et al. Роль серотонина в тревоге у рыбок данио (Danio rerio): взаимосвязь с уровнями серотонина и эффектом буспирона, WAY 100635, SB 224289, флуоксетина и пара-хлорфенилаланина (pCPA) в двух поведенческих моделях.Neuropharmacol. 71, 83-97 (2013).
42. Пелли, М. и Коннотон, В. П. Хроническое воздействие экологически значимых концентраций флуоксетина (прозака) снижает выживаемость, усиливает ненормальное поведение и задерживает реакцию бегства хищников у гуппи. Chemosphere 139, 202-209 (2015).
43. Valenti, T. et al.
Терапевтические уровни селективного ингибитора обратного захвата серотонина (СИОЗС) сертралина в плазме человека снижают связывание переносчика обратного захвата серотонина и поиск убежища у взрослых самцов толстоголовых гольянов.Environ. Sci. Tech. 46, 2427-2435 (2012).
44. Олсен, К. Х., Аск, К., Олсен, Х., Порш-Халльстром, И. и Халлгрен, С. Влияние циталопрама СИОЗС на поведение, связанное со стрессом и воспроизводством у гуппи Эндлера, Poecilia wingei. Акват. Toxicol. 151, 97-104 (2014).
45. Мельник-Ламонт, Н., Бест, К., Гесто, М. и Виджаян, М. М. Антидепрессант Венлафаксин нарушает уровни моноаминов в мозге и нейроэндокринные реакции на стресс у радужной форели.Environ. Sci. Technol. 48, 13434-13442 (2014).
46. Пейнтер М. М. и др. Антидепрессанты в экологически значимых концентрациях влияют на избегание хищников личинок толстоголовых гольянов (pimephales promelas). Environ. Toxicol. Chem. 28, 2677-2684 (2009).
47. Бизеси, Дж. Х., Бриджес, В. и Клейн, С. Дж. Влияние антидепрессанта венлафаксина на серотонин мозга рыб и поведение хищников. Акват. Toxicol. 148, 130-138 (2014).
48.Бизеси, Дж. Х., Свит, Л. Е., Ван ден Херк, П. и Клейн, С. Дж. Влияние смеси антидепрессантов на серотонин в мозге и хищническое поведение гибридных полосатых окуней. Environ. Toxicol. Chem. 35, 938-945 (2016).
49. Саймонс, К. Дж., Уотсон, В. Т. А., Мартин, Т. Дж., Чен, X. Y. и Саймонс, Ф. Е. Р. Дифенгидрамин — фармакокинетика и фармакодинамика у пожилых людей, молодых людей и детей. J. Clin. Pharmacol. 30, 665-671 (1990).
50.Реккер, Р. Ф., Тиммерма, Х., Хармс, А. Ф. и Наута, В. Т. Изменения антигистаминной и антихолинергической активности производных дифенгидрамина при кватернизации и роли асимметричного центра. Чим. Инд. (Милан) 7, 279- и (1972).
51. Домино, Э. Ф. История современной психофармакологии: личный взгляд с акцентом на антидепрессанты.
Психосом. Med. 61, 591-598 (1999).
52. Xie, Z. et al. Биоконцентрация, метаболизм и эффекты дифенгидрамина на поведенческие и биохимические маркеры у карася (Carassius auratus).Sci. Total Environ. 544, 400-409 (2016).
53. Kristofco, L.A. et al. Возраст имеет значение: стадия развития личинок Danio rerio влияет на пороги фотомоторной реакции на диазинион или дифенгидрамин. Акват. Toxicol. 170, 344-354 (2016).
54. Berninger, J. P. et al. Воздействие антигистаминного дифенгидрамина на отдельные водные организмы. Environ. Toxicol. Chem. 30, 2065-2072 (2011).
55. Tanaka, T. et al. Передозировка дифенгидрамина имитирует серотониновый синдром.Psychiatry Clin. Neurosci. 65, 534-534 (2011).
56. Гулсби, Э. У., Мейсон, К. М., Войчик, Дж. Т., Джордан, А. М. и Блэк, М. С. Острые и хронические эффекты смесей дифенгидрамина и сертралина у цериодафнии dubia. Environ. Toxicol. Chem.
32, 2866-2869 (2013).
57. Прасад П., Огава С. и Пархар И. С. Роль серотонина в воспроизводстве рыб. Передний. Neurosci. 9 (2015).
58. de Assis, H. C. S. et al. Эстрогеноподобные эффекты у самцов золотых рыбок, подвергнутых совместному воздействию флуоксетина и 17-альфа-этинилэстрадиола.Environ. Sci. Technol. 47, 5372-5382 (2013).
59. Брукс Б. В., Райли Т. М. и Тейлор Р. Д. Качество воды в экосистемах с преобладанием сточных вод: экотоксикологические, гидрологические и управленческие соображения. Hydrobiologia 556, 365-379 (2006).
60. Benskin, J. P. et al. Environ. Sci. Technol. 48, 11670-11678 (2014).
61. McCallum, E. S. et al. Воздействие сточных вод на месте снижает выживаемость, но мало влияет на поведение или физиологию инвазивных рыб Великих озер.Акват. Toxicol. 184, 37-48 (2017).
62. Арнотт, Дж. И Элвуд, Р. Исследование агрессивной мотивации у цихлид.
Биол. Lett. 5, 762-764 (2009).
63. Cribari-Neto, F. & Zeileis, A. Бета-регрессия в R. J. Stat. Софтв. 34, 1-24 (2010).
Благодарности
Финансирование этого исследования предоставлено JS и DM частично Планом действий правительства Канады по поводу Великих озер. Финансирование метаболомического анализа компанией Axys было предоставлено правительством Канады по программе Build in Canada.Финансовая поддержка поведенческого анализа была предоставлена грантом NSERC Discovery Grant и Канадской программой кафедр исследований для SB, а также стипендией NSERC для аспирантов EM. Мы благодарим Natural Resources Canada, Atlas of Canada, за разрешение использовать картографическую информацию для Cootes Paradise и Jordan Harbour в рамках лицензии открытого правительства — Канада (рис. 1).
Авторские взносы
D.S. синтезировал результаты и подготовил рукопись. Дж.С. и Д.С. разработали исследование.
ДО Н.Э. и J.C. провели целевой метаболомный анализ. Э.М. и С.Б. провели поведенческие анализы. J.S., E.M., S.B. и B.C. помогал с подготовкой и редактированием рукописи.
Дополнительная информация
Дополнительная информация прилагается к этому документу на https://doi.org/10.1038/s41598-017-15989-z. Конкурирующие интересы: авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов.
Примечание издателя: Springer Nature сохраняет нейтралитет в отношении юрисдикционных претензий на опубликованных картах и институциональной принадлежности.Лицензия M, которая разрешает использование, совместное использование, адаптацию, распространение и воспроизведение на любом носителе или любом формате, при условии, что вы надлежащим образом укажете первоначального автора (авторов) и источник, предоставите ссылку на лицензию Creative Commons и укажете, если внесены изменения. Изображения или другие материалы третьих лиц в этой статье включены в лицензию Creative Commons для статьи, если иное не указано в кредитной линии для материала.