Т16Мг форум: Т16 Бук светлый Заглушки торцевые (пара)

Содержание

Т16 Бук светлый Заглушки торцевые (пара)

Характеристики

Торговый дом «ВИМОС» осуществляет доставку строительных, отделочных материалов и хозяйственных товаров. Наш автопарк — это более 100 единиц транспортных стредств. На каждой базе разработана грамотная система логистики, которая позволяет доставить Ваш товар в оговоренные сроки. Наши специалисты смогут быстро и точно рассчитать стоимость доставки с учетом веса и габаритов груза, а также километража до места доставки.

Заказ доставки осуществляется через наш колл-центр по телефону: +7 (812) 666-66-55 или при заказе товара с доставкой через интернет-магазин. Расчет стоимости доставки производится согласно тарифной сетке, представленной ниже.

Точная стоимость доставки определяется после согласования заказа с вашим менеджером.

Уважаемые покупатели! Правила возврата и обмена товаров, купленных через наш интернет-магазин регулируются Пользовательским соглашением и законодательством РФ.

ВНИМАНИЕ! Обмен и возврат товара надлежащего качества возможен только в случае, если указанный товар не был в употреблении, сохранены его товарный вид, потребительские свойства, пломбы, фабричные ярлыки, упаковка.

Доп. информация

Цена, описание, изображение (включая цвет) и инструкции к товару Т16 Бук светлый Заглушки торцевые (пара) на сайте носят информационный характер и не являются публичной офертой, определенной п.2 ст. 437 Гражданского кодекса Российской федерации. Они могут быть изменены производителем без предварительного уведомления и могут отличаться от описаний на сайте производителя и реальных характеристик товара. Для получения подробной информации о характеристиках данного товара обращайтесь к сотрудникам нашего отдела продаж или в Российское представительство данного товара, а также, пожалуйста, внимательно проверяйте товар при покупке.

Купить Т16 Бук светлый Заглушки торцевые (пара) в магазине Сланцы вы можете в интернет-магазине «ВИМОС».

Тройник (цанга) 1603-Т16*16*16 в Хабаровске | Интертул

Код товара:
30627

Артикул производителя:

intt-30627

Вы можете приобрести этот товар по розничной цене в Хабаровске: 153,00 pуб.

146,00 pуб.

Добавить в корзину

Хотите приобрести дешевле?

Предварительная дата выдачи: Сегодня — пн. — 4 апр.

← Апрель 2022 →
Пн Вт Ср Чт Пт Сб Вс
28293031123
45678910
11121314151617
18192021222324
2526272829301

Добавить к сравнениюУдалить из сравнения

Добавить в закладкиУдалить из закладок

Основанная в 1981 году, компания General Fittings быстро стала лидирующей компанией в секторе фитингов для трубопроводных систем и систем обогрева.

 

Компания напрямую управляет полным производственным циклом, от момента разработки до доставки, использует самые современные технологии и заботится о качестве. 


Внимание! Фирма-производитель может по своему усмотрению изменять комплектацию, конструкцию и дизайн товара. Поэтому, чтобы не возникло недоразумений, перед покупкой советуем уточнять у менеджера нашей компании информацию о комплектации и технических характеристиках конкретной модели.

Цена на сайте действует только при оформлении заказа через интернет-магазин и может отличаться от цены в магазинах.

Agras T16 — Информация о продукте

Дрон
1.Каковы возможности полета T16?

Максимальная высота полета T16 составляет 30 м.
Максимальное расстояние сообщения – 3 км при высоте полета 2,5 м.
Максимальная скорость полета – 10 м/с, максимальная скорость полета при обработке – 7 м/с.
Время зависания T16 в воздухе составляет 18 минут при взлетной массе 24,5 кг и 10 минут при 39,5 кг.

2.Какую площадь T16 способен обработать за час?

T16 способен обработать до 10 гектаров в час при диаметре распыления 6,5 м, скорости 6 м/с и высоте 2 м.

3.Каковы преимущества T16 по сравнению с серией MG-1P?

У модели Т16 выше параметры массы полезной нагрузки, диаметра распыления и эффективности.
Благодаря модульному дизайну можно быстро заменить аккумулятор и бак.
Уровень защиты основного модуля составляет IP67.
T16 оснащен такими функциями как радар для получения изображений при помощи цифрового формирования лучей, активное огибание препятствий, распознавание объектов с помощью искусственного интеллекта (ИИ) и режим для садов (Orchard).

4.В каком направлении вращаются пропеллеры T16? Пропеллеры M2, M4 и M5 вращаются по часовой стрелке, а M1, M3 и M6 – против часовой стрелки.
5.В чем разница между внешним видом и направлением вращения пропеллеров T16 и других стандартных 6-роторных дронов?

Пропеллеры T16 были разработаны таким образом, что их конструкция и направление вращения создают стабильный нисходящий поток воздуха, который снижает эффект тумана над аппаратом, увеличивает диаметр распыления и улучшает процесс седиментации.

6.Можно ли управлять несколькими летательными аппаратами T16 с помощью одного пульта управления?

Да.

7.Как выполнить сопряжение дрона T16 с пультом?

Для начала сопряжения двух устройств нажмите и удерживайте кнопку питания в течение пяти секунд.

8.Есть ли отдельные версии T16 с GPS и RTK?

T16 поддерживает дублирование RTK + спутниковых систем позиционирования. Отдельных версий не существует.

9.Совместим ли дрон T16 с мобильной станцией D-RTK 2?

Да.

10.В чем преимущество курсовой камеры T16 перед камерой MG-1P? Можно ли сохранить видео, записанные с помощью курсовой камеры?

Кадры, полученные с помощью T16, более качественные и плавные. Видео, записанные с помощью курсовой камеры, нельзя сохранить.

11.Требуется ли сборка летательного аппарата T16?

Нет. Сборка аппарата не требуется. Его можно использовать сразу после активации.

12.Можно ли сложить платформу T16?

Да. В сложенном состоянии T16 занимает до 25% исходного размера.

13.Произойдет ли автоматическое включение T16 после установки в него аккумуляторов?

Нет. Для включения T16 необходимо нажать и удерживать кнопку питания на аккумуляторе.

14.В чем разница между пультами управления для T16, MG-1P и Phantom 4 RTK? Являются ли они взаимозаменяемыми?

Программное обеспечение (ПО) пультов управления для T16, MG-1P и Phantom 4 RTK различается, однако их аппаратное обеспечение схоже. Если у вас уже есть пульт для MG-1P или Phantom 4 RTK, вы можете обновить ПО, чтобы использовать его с T16.

15.Каково безопасное расстояние для управления T16 при взлете и посадке?

Рекомендуемое расстояние составляет по меньшей мере 10 м.

Распыление
1.Каков максимальный объем бака T16? Можно ли его быстро заменить?

Объем стандартного бака составляет 15 л, а максимальный объем – 16 л. Пользователи могут легко заменить бак.

2.Какова максимальная скорость распыления T16?

При использовании распылителя XR11001VS T16 может производить обработку со скоростью 3,6 л/мин.
При использовании распылителя XR110015VS – 4,8 л/мин.

3.Каково давление насоса T16?

2–4 кг/см².

4.Являются ли насосы T16 и MG-1P взаимозаменяемыми?

Нет.

5.Являются ли распылители и декомпрессионные клапаны T16 и MG-1P взаимозаменяемыми?

Да.

6.Показывает ли T16 остаток жидкости в реальном времени?

Да.

7.В чем заключается задача встроенной NFC (ближняя бесконтактная связь)?

Встроенная NFC обеспечивает корректную установку бака.

8.В чем заключаются преимущества электромагнитного расходомера T16?

Электромагнитный расходомер обеспечивает высокую точность измерений – с погрешностью менее ±2%.
Изменения параметров плотности, вязкости, температуры или давления не влияют на данные.
Электромагнитный расходомер является коррозиеустойчивым и оборудован прочной измерительной трубкой.
Благодаря этому он имеет длительный срок службы.

Предотвращение столкновений
1.Необходимо ли управлять T16 вручную для использования функции активного огибания препятствий?

Нет. T16 способен огибать препятствия автоматически.

2.Как облака точек формируют модели препятствий?

Технология цифрового формирования лучей создает модели препятствий с помощью облаков точек. T16 в реальном времени определяет ширину, угол направления и местоположение препятствия, а затем огибает его.

3.В каком направлении работает высокоточный радар?

Рабочая область радара находится в передней и задней части летательного аппарата,
ее горизонтальный угол обзора составляет ±50°, а вертикальный — 0°…10°.

4.Являются ли радар для получения изображений при помощи цифрового формирования лучей и высокоточный радар серии MG-1P взаимозаменяемыми?

Нет.

Планирование заданий
1.Как работает функция планирования полетов в 3D T16?

После получения ортофотокарт с помощью Phantom 4 RTK используйте программу DJI Terra, поддерживающую режим Orchard (обработка садов), чтобы создать трехмерную модель участка. После выбора участка система ИИ автоматически определит культуры и препятствия и автоматически создаст маршруты полета в 3D. После скачивания маршрутов T16 автоматически начнет обработку.

2.В чем сходства и различия между сбором изображений для планирования полетов в 3D с помощью T16 и используемым ранее ПО PC GS Pro?

В обоих случаях вы получаете ортофотокарты при помощи аппаратов серии Phantom 4, однако карты полей создаются по-разному.

3.Какие объекты распознает DJI Terra в режиме Orchard (сады) с помощью технологии распознавания с ИИ?

DJI Terra способно определять сады, здания, водоемы, линии электропередач и поверхность земли.

4.Может ли T16 производить обработку деревьев, расположенных на поверхности с неровным рельефом и разными высотами?

Да. DJI Terra определяет местоположение и высоту фруктовых деревьев благодаря 3D-картам и технологии распознавания объектов с ИИ. T16 распознает фруктовые деревья и устанавливает параметры полета так, чтобы маршрут проходил на постоянной высоте от них.

Аккумулятор и зарядное устройство
1.В чем разница между аккумуляторами для T16 и MG-1P?

Аккумулятор T16 можно быстро заменить, он имеет долгий срок службы, высокие параметры напряжения и емкости. Для справки:
Аккумулятор для Agras T16: 14S, 17 500 мАч, эталонное напряжение: 51,8 В, 400 циклов.
Аккумулятор для Agras MG-1P: 12S, 12,000 мАч, эталонное напряжение: 44,4 В, 200 циклов.

2.Чем отличаются зарядные устройства для T16 и MG-1P? Являются ли они взаимозаменяемыми?

Выходная мощность зарядного устройства для T16 составляет 2600 Вт.
Оно поддерживает режим быстрой зарядки и способно полностью зарядить один аккумулятор за 20 минут.
4-канальное зарядное устройство для аккумуляторов Intelligent Battery (2600 Вт) одновременно заряжает четыре аккумулятора за 80 минут.
Зарядное устройство для T16 может заряжать аккумулятор MG-12000P, а зарядное устройство для серии MG не может заряжать аккумулятор для T16.

Хронический понос??? | TheCatSite

Первоначально Послано icklemiss21

Sharky может помочь с едой, я нашел ингредиенты, но это не ссылка на страницу, так что вот они

СУХИЕ

Синяя упаковка — рыба
Зерновые Это может, насколько я понимаю быть любым зерном и, вероятно, меняет мешок за мешком на то, что когда-либо было самым дешевым, производные растительного происхождения. В моем понимании это продукты растительного происхождения (то есть то, что большинство из нас берет и выбрасывает)… Кошкам нужно очень мало растительных веществ, всего 3-5%, это второй ингредиент, который обычно означает 20-30% продуктов животного происхождения, которые в основном представляют собой кости в сухой форме, масла и жиры, минералы. источник, дрожжи, ИМХО, являются более высоким аллергеном, чем любое зерно или мясо, рыба и рыбные производные (минимум 4% лосося в наггетах, минимум 4% тунца в наггетах с тунцом) продукты из рыбы и не менее 8% из них являются БОЛЬШИМИ аллергенами лосося и тунца, у кошек с различными сахарами НЕТ потребности в сахаре любого вида, моллюсках и ракообразных (минимум 4% креветок в наггетах с креветками), в том числе раковины, которые я не могу, окрашены добавками ЕС, вторыми после дрожжей ИМХО самый большой аллерген в этой и многих формулах.

Типичные значения \tТипичный анализ\t
Белок \t30,0% \t
Масла и жиры \t10,0% низкий ИМХО \t
Клетчатка \t4,0% \t
Зола \t8,0% большинство продуктов питания 5,5 до 7,5 %\т
Витамин А \t12000 МЕ/кг \т
Витамин D3 \t1000 МЕ/кг \т
Витамин Е \t80мг/кг \т
Медь в виде сульфата меди \t10мг/кг

—— —————

Красная упаковка — утка, кролик, овощи См. выше это не лучше
Зерновые, продукты растительного происхождения, мясо и продукты животного происхождения (мин. в наггете с уткой, мин. 4% Кролик в наггете), масла и жиры, минералы, овощи (мин.4% горох в наггете с овощами), дрожжи, различные сахара, красители с добавками ЕС.

Типичные значения \tТипичный анализ\t
Белок \t30,0% \t
Масла и жиры \t10,0% \t
Клетчатка \t4,0% \t
Зола \t8,0% \t
Витамин А \ t12000 МЕ/кг \ t
Витамин D3 \ t1000 МЕ/кг \ t
Витамин Е \ t80 мг/кг \ t
Медь в виде сульфата меди \ t10 мг/кг

————— —

Желтая упаковка — курица Да, это еще хуже
Зерновые, продукты растительного происхождения, мясо и продукты животного происхождения (минимум 4% цыпленка в наггетах с курицей, минимум 4% индейки в наггетах с индейкой), масла и Жиры , Минералы (минимум 1% кальция) , Дрожжи , Различные сахара , Окрашенные добавками EC

Типичные значения \tТипичный анализ \t
Белок \t30. 0% \t
Масла и жиры \t10,0% \t
Клетчатка \t4,0% \t
Зола \t8,0% \t
Витамин А \t12000 МЕ/кг \t
Витамин D3 \t1000 МЕ/ кг
Витамин Е 80 мг/кг
Медь в виде сульфата меди 10 мг/кг

и WET

желтый
Мясо и продукты животного происхождения (курица мин. 4%, индейка мин. 4%), злаки , Минералы , Окрашенные добавками ЕС .
Типичные значения \т на 100 г \т
Белки \т6,5 г \т
Масла и жиры \т5,0 г \т
Клетчатка \т0.4 г \ т

Зола \ т 2,5 г \ т
Влага \ т 80,0 г \ т
Витамин А \ т 2000 мкг / кг \ т
Витамин D3 \ т 200 мкг / кг \ т
Витамин Е \ т 16 мг / кг \ т
Медь в виде сульфата меди \t1 мг/кг

——————

Красный
Мясо и продукты животного происхождения (кролик не менее 4%, курица не менее 4%), Минералы , различные сахара , окрашенные добавками EC .
Типичные значения \т на 100 г \т
Белки \т7,0 г \т
Масла и жиры \т4,5 г \т
Клетчатка \т0,4 г \т
Зола \т2. 5г\т
Влага\t83.0г\т
Витамин А\t2000мкм/кг\т
Витамин D\t200мкмк/кг\т
Витамин Е\t16мг/кг\т
Медь в виде сульфата меди \t1мг/кг

—————————

Молбанк | Бесплатный полнотекстовый | N,N-Бис(4′-(гексилокси)-[1,1′-бифенил]-4-ил)тиофен-2-амин

2. Результаты и обсуждение

Мы провели исследование кросс- реакция сочетания бис(4′-(гексилокси)-[1,1′-бифенил]-4-ил)амина 1 с 2-бромтиофеном 3 с наиболее часто используемым N,N-бис(арил)тиофеном -2-аминные и 2-бромтиофеновые катализаторы — трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0), три-трет-бутилфосфин и трет-бутанолат натрия (схема 1, табл. 1) [11,12,13].Поиск оптимальных условий реакции осуществлялся путем варьирования природы растворителей и температуры химических реакций. Показано, что при проведении реакции в кипящем бензоле выход продукта реакции 2 не превышает 10% (табл. 1, опыт 1). Замена бензола на более высококипящий толуол привела к введению тиенильного фрагмента в молекулу амина 1 в течение 24 ч с получением продукта 2, с выходом 30% (табл. 1, опыт 2).При использовании в качестве растворителя ксилола и нагревании реакционной смеси до 120 °С выход целевого продукта 2 достигает 45 % (табл. 1, опыт 3). Дальнейшее повышение температуры реакции до 130 °С не привело к увеличению выхода соединения 2 (табл. 1, опыт 4).

Структура N,N-бис(4′-(гексилокси)-[1,1′-бифенил]-4-ил)тиофен-2-амина 2 подтверждена с помощью элементного анализа, масса высокого разрешения спектрометрия, 1 H, 13 C ЯМР, ИК и УФ спектроскопия, масс-спектрометрия.

3. Материалы и методы

Бис(4′-(гексилокси)-[1,1′-бифенил]-4-ил)амин 1 получали по опубликованному методу [10]. Растворители и реагенты приобретались из коммерческих источников и использовались в том виде, в каком они были получены. Элементный анализ выполняли на элементном анализаторе 2400 (Perkin ElmerInc., Уолтем, Массачусетс, США). Температуру плавления определяли на приборе Кофлера с подогревом и не корректировали. Спектры ЯМР 1 H и 13 C снимали на приборе Bruker AM-300 (Bruker AXS Handheld Inc., Kennewick WA, США) (на частотах 300 и 75 МГц) в растворе CDCl 3 , стандарт ТМС. Значения J даны в Гц. Спектр МС (ЭУ, 70 эВ) получен на приборе Finnigan MAT INCOS 50 (Hazlet NJ, США). ИК-спектр измеряли на приборе Bruker Alpha-T в таблетке KBr. Спектр МС высокого разрешения измеряли на приборе Bruker micrOTOF II (Bruker Daltonik Gmbh, Бремен, Германия) с использованием ионизации электрораспылением. Спектры поглощения раствора регистрировали на спектрофотометре UV/Vis/NIR ОКБ Спектр СФ-2000 с программным обеспечением СФ-2000.Образец измеряли в кварцевой кювете диаметром 1 см при комнатной температуре с концентрацией 4,8 × 10 -5 моль/мл в CH 2 Cl 2,

Смесь бис(4′-(гексилокси)-[1 ,1′-бифенил]-4-ил)амин 1 (60 мг, 0,11 ммоль), 2-бромтиофен 3 (28 мг, 0,17 ммоль), NaOBu t (16 мг, 0,17 ммоль) и Pd 2 (dba) 3 (2 мг, 2 ммоль %) в ксилоле (5 мл) дегазировали аргоном и нагревали до 120 °C в атмосфере аргона в течение 20 часов. По завершении смесь выливали в воду и экстрагировали CH 2 Cl 2 (3 × 10 мл).Объединенные органические фазы промывали рассолом (2×5 мл), сушили над MgSO 4 , фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (силикагель Merck 60, элюент гексан–CH 2 Cl 2 , 2:1, об./об.). Выход 30 мг (45%), желтое масло, R f = 0,3 (гексан–CH 2 Cl 2 , 2:1, об./об.). ИК спектр, ν, см –1 : 2953, 2928 и 2858 (все С–Н), 1608, 1496, 1471, 1274, 1250, 1177, 820, 674, 516. 1 H ЯМР (м.д.): δ 7.53–7.47 (8H, м), 7.22 (д, J = 8.6, 4H), 7.05 (д, J = 4.8, 1H), 6.99–6.93 (5H, м), 6,81 (д, J = 3,5, 1H), 4,02 (т, J = 6,6, 4H), 1,83 (п, J = 6,7, 4H), 1,56–1,46 (м, 4), 1,42–1,37 (8H, м) , 0,97–0,92 (6Н, м). 13 С ЯМР (м.д.): δ 158,5, 151,3, 146,6, 135,4, 133,0, 127,7, 127,3, 126,0, 122,5, 121,5, 120,8, 114,8, 68,1, 31,6, 25,7, 25,3, 29,3 HRMS (ESI-TOF), m/z: рассчитано для C 40 H 46 NO 2 S [M + H] + , 604. 3244, найдено, 604.3228. МС (ЭИ, 70 эВ), m/z (I, %): 606 ([М + 3] + , 3), 605 ([М + 2] + , 9), 604 ([М + 1 ] + , 60), 603 ([М] + , 100), 518 (12), 43 (5). Спектры UV-Vis (в CH 2 Cl 2 ), λmax: 267 нм (ε = 17 850 M -1 см -1 ), 331 нм (ε = 22 402 M -1 см — 1 ). Анальный. расч. Для C 40 H 45 NO 2 S (603,8568): C 79,56; Н, 7,51; Н, 2,32. Найдено: С 79,85; Ч, 7.72; Н, 2,49%.

Европа PMC

J Нанобиотехнология. 2021; 19: 198.

, # # 1, 2 , # 1 , # 1 , 1 , 1 , 1 , 1 , 4 5 , 9 , 1, 2 и и 1, 2, 3 8 3

Yufu ZHU

1 Институт болезней нервной системы, Медицинский университет Xuzhou, Xuzhou, 221002 Китай

2 Департамент нейрохирургии, дочерняя больница Сюйчжоу Медицинский университет, Xuzhou, 221002 China

Jun Jia

1 Институт болезней нервной системы, Медицинский университет Xuzhou, Xuzhou, 221002 China

Gang Zhao

1 Институт болезней нервной системы, Медицинский университет Сюйчжоу, Сюйчжоу, 221002 Китай

Сюян Хуан

1 Институт болезней нервной системы, Медицинский университет Сюйчжоу, Сюйчжоу, 221002 Китай

Lansheng Wang

1

1 Институт болезней нервной системы, Сючжоу Медицинский университет, Xuzhou, 221002 Китай

Yongkang Чжан

1 Институт болезней нервной системы, Медицинский университет Xuzhou, Xuzhou, 221002 China

Чжан

1 Институт заболеваний нервной системы, Сюйчжоу Медицинский университет, Xuzhou, 221002 Китай

Navena Konduru

4 Институт международного образования, Xuzhou Medical University, Xuzhou, 221002 China

июн Xie

5 Школа наук о жизни, Университет Цзянсу, Сюйчжоу, 221116 Китай

Рутонг Ю

1 Институт болезней нервной системы, Медицинский университет Сюйчжоу, Сюйчжоу, 221002 Китай

Больница Нейчжоу, больница Сюйчжоу 2 Медицинский университет, Сюйчжоу, 221002 Китай

Хунмей Лю

9000 4 1 Институт болезней нервной системы Медицинского университета Сюйчжоу, Сюйчжоу, 221002 Китай

2 Отделение нейрохирургии, больница-филиал Медицинского университета Сюйчжоу, Сюйчжоу, 221002 Китай

3 Народное отделение нейрохирургии Больница при Медицинском университете Сюйчжоу, Сюйчжоу, 221002 Китай

1 Институт болезней нервной системы, Медицинский университет Сюйчжоу, Сюйчжоу, 221002 Китай

2 Отделение нейрохирургии, филиал больницы Сюйчжоуского медицинского университета 22 Сюйчжоу, 22100, Сюйчжоу, 221002 Китай

3 Отделение нейрохирургии, Третья народная больница при Медицинском университете Сюйчжоу, Сюйчжоу, 221002 Китай

4 Институт международного образования, Сюйчжоуский медицинский университет, Сюйчжоу, 221002 Китай

5 4 2 Школа естественных наук , Цзянсуский педагогический университет, Сюйчжоу, 221116 Китай

9 0116 Автор, ответственный за переписку.

# Внесли поровну.

Поступила в редакцию 5 марта 2021 г .; Принято 23 июня 2021 г.

Открытый доступ Эта статья находится под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 International License, которая разрешает использование, совместное использование, адаптацию, распространение и воспроизведение на любом носителе или в любом формате при условии, что вы укажете оригинал. автор(ы) и источник, предоставьте ссылку на лицензию Creative Commons и укажите, были ли внесены изменения. Изображения или другие сторонние материалы в этой статье включены в лицензию Creative Commons на статью, если иное не указано в кредитной строке материала.Если материал не включен в лицензию Creative Commons статьи, а ваше предполагаемое использование не разрешено законом или выходит за рамки разрешенного использования, вам необходимо получить разрешение непосредственно от правообладателя. Чтобы просмотреть копию этой лицензии, посетите http://creativecommons.org/licenses/by/4. 0/. Отказ Creative Commons от права на общественное достояние (http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/) применяется к данным, представленным в этой статье, если иное не указано в кредитной линии данных.

Связанные данные

Дополнительные материалы
Дополнительный файл 1: Рисунок S1. (A) Спецификация пробойника для биопсии. (B) Расширение предыдущего трепанационного отверстия, чтобы обнажить мозг и опухолевую ткань (а). Резекция опухоли с помощью 2 мм пробойника для биопсии (б). Полость резекции (в). Гидрогели вводили в полость резекции (г). Рисунок S2. Экспрессия MMP2 и MMP9 в группе имитации/резекции in vivo . Рисунок S3. (A) Репрезентативные изображения окрашивания АФК в группе имитации и резекции in vivo с использованием зеленого флуоресцентного зонда DCFH-DA.Масштабная линейка = 300 мкм. (B) Выражения ROS были проанализированы количественно с использованием анализа интегральной оптической плотности (IOD).
Заявление о доступности данных

Все данные, полученные или проанализированные в ходе этого исследования, включены в эту рукопись и ее Дополнительный файл.

Реферат

История вопроса

В настоящее время послеоперационный рецидив злокачественных глиом представляет собой клиническую загадку. Хуже того, не существует стандартного лечения этих рецидивирующих опухолей.Поэтому срочно необходимы новые перспективные методы клинического лечения.

Результаты

Результаты подтвердили ответное высвобождение TMZ, инкапсулированного в гидрогеле T/PPS+TMZ, и гидрогель продемонстрировал превосходную эффективность против глиомы в модели операции с неполной глиомой, что показало, что гидрогель T/PPS+TMZ эффективно ингибировал рост рецидивирующей глиомы.

Заключение

Таким образом, мы успешно разработали инъекционные гидрогели, чувствительные к ММП и АФК, которые могли обеспечить замедленное высвобождение TMZ в хирургической полости для ингибирования местного рецидива глиомы после операции.

Графический реферат

Дополнительная информация

Онлайн-версия содержит дополнительные материалы, доступные по адресу 10.1186/s12951-021-00943-z.

Ключевые слова: Местная доставка лекарств, глиома, гидрогель, операция, рецидив

История вопроса

Глиома является наиболее распространенным типом первичной опухоли головного мозга и происходит из нервного эпителия [1, 2]. Хотя методы лечения злокачественных глиом, включая хирургию, лучевую терапию и химиотерапию, широко используются, терапевтический эффект остается слабым [3–6].Медиана выживаемости пациентов со злокачественной глиомой составляет менее 14,6 месяцев [7, 8]. Самой сложной проблемой в лечении глиомы является послеоперационный рецидив. Полная резекция считается невозможной при глиомах высокой степени злокачественности, а остаточные клетки глиомы способствуют послеоперационному рецидиву глиомы [9]. Клинические исследования показали, что 80–90% рецидивирующих глиом возникают в пределах 2 см от исходной области [8, 10, 11]. Уменьшение рецидивов глиом, вызванных остаточными опухолевыми клетками, стало важной темой клинических исследований и практики.

В настоящее время не существует специфического лечения рецидивирующих глиом. ТМЗ по-прежнему остается химиотерапевтическим препаратом первой линии для клинического лечения рецидивирующих глиом [12–14]. Однако терапевтическая эффективность TMZ часто ограничивается несколькими факторами, включая его короткий период полувыведения in vivo, быстрое разложение, проницаемость гематоэнцефалического барьера (ГЭБ) и устойчивость к химиотерапии, индуцированную O 6-метилгуанин-ДНК-метилтрансферазой (MGMT). ) [13, 15–17].

Чтобы преодолеть вышеупомянутые проблемы, ученые попытались доставить TMZ непосредственно в области опухоли in situ.Локальная доставка ТМЗ позволяет избежать системной циркуляции лекарств, снизить токсичность для нормальных тканей, обеспечить локализованное пролонгированное высвобождение лекарств и тем самым увеличить количество лекарств в очаге опухоли [18-20]. Инъекционные гидрогели, содержащие лекарственные средства, как местный метод доставки лекарств привлекли большое внимание в терапии глиомы, поскольку они могут обходить ГЭБ и воздействовать непосредственно на области опухоли, увеличивая локальные концентрации лекарственного средства, сводя к минимуму побочные эффекты системного воздействия лекарственного средства. 19, 21–25].

Гидрогели представляют собой полимерные сетчатые системы с водой в качестве дисперсионной среды, которые могут быть получены с помощью УФ-облучения, введения необратимых ковалентных связей или путем самосборки посредством химических реакций [26, 27]. Механические свойства гидрогелей можно непрерывно регулировать, контролируя соотношение воды. Кроме того, гидрогели обладают такими преимуществами, как хорошая биосовместимость, отсутствие цитотоксичности, низкая цена, и демонстрируют широкие перспективы применения в области лечения рака [28, 29].Системы доставки лекарств на основе гидрогелей широко использовались в доклинических исследованиях [25, 30–33]. Однако из-за отсутствия баланса между различными соображениями эта очень многообещающая стратегия не сработала, как ожидалось. На сегодняшний день только Gliadel® был одобрен FDA для клинического лечения и продемонстрировал ограниченную эффективность и множество побочных эффектов по сравнению со стандартной химиотерапией [34].

В этом исследовании мы разработали биоразлагаемый гидрогель с двойной реакцией (ROS- и MMPs-) для обеспечения локальной доставки TMZ (T/PPS+TMZ).Гидрогели PPS60, покрытые липидом T, были приготовлены для загрузки TMZ и имплантированы в хирургическую полость (рис. ). Гидрогель T/PPS+TMZ обладал следующими особенностями: (1) липиды T присутствовали во внешнем слое гидрогеля T/PPS+TMZ с чувствительностью к MMP, тогда как ROS-чувствительный PPS60 присутствовал во внутреннем слое; (2) гидрогель T/PPS+TMZ показал полутвердую природу с некоторой степенью текучести; и (3) высвобожденный TMZ вводили в глиомы для уничтожения остаточных клеток глиомы. In vivo гидрогель T/PPS+TMZ эффективно снижал пролиферацию остаточных клеток глиомы и повышал эффективность TMZ. Таким образом, наше исследование представило многообещающую стратегию подавления рецидива опухоли, которая позволила провести дальнейшие исследования.

Методы

Материалы

Калиевая соль d-люциферина, TMZ, рекомбинантные MMP2 и MMP9 человека были получены от Dalian Meilun Biotech Co., Ltd. (Далянь, Китай). Набор для анализа живых мертвецов был приобретен у Jiangsu Keygen Biotech Co., Ltd. (Нанкин, Китай). Поли-d,l-молочная-со-гликолевая кислота (PLGA) с концевыми концевыми группами пропилена, пропиленсульфид и 2-йодоэтанол были приобретены у Sigma-Aldrich.

Мыши и клетки

Самцы мышей (C57BL/6 и BALB/c голые, 6–8 недель) были приобретены у HFK Bioscience Co., Ltd. (Пекин, Китай). Исследование на животных было одобрено Комитетом по уходу и использованию животных Медицинского университета Сюйчжоу. Линии клеток глиомы (GL261, C6 и U87) были получены из Шанхайского банка клеток Китайской академии наук (Шанхай, Китай). Клетки C6-GFP-Luci трансфицировали геном люциферазы. Все клетки культивировали в среде DMEM (Gibco, Карлсбад, Калифорния, США) с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки с 1% пенициллином натрия и сульфатом стрептомицина.

Синтез ПФС60 и характеристики гидрогелей

ПФС 60 -ОН был синтезирован в соответствии с предыдущей литературой с некоторыми модификациями [35]. В высушенной и продутой азотом колбе RB дегазировали 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (ДБУ) (258 мг, 1,5 ммоль) в сухом ТГФ в течение 30 мин, и температура реакционной смеси была понижена до 0°С. В эту колбу по каплям добавляли дегазированный раствор 1-бутантиола (45 мг, 0,5 ммоль) и оставляли для реакции на 30 минут.Позже к реакционной смеси добавляли дегазированный мономер пропиленсульфида (2,96 г, 40 ммоль) и поддерживали температуру на уровне 0 °C в течение 2 часов. Реакцию гасили добавлением 2-иодэтанола (172 мг, 1 ммоль) и перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. На следующий день раствор полимера фильтровали для удаления осажденной соли и дополнительно очищали тремя осаждениями в холодном метаноле перед вакуумной сушкой с получением бесцветного вязкого полимера. 1 H ЯМР (400 МГц, CDCl 3 ): δ 3.75 (с, 3H), 3,48 (к, J = 7,0 Гц, 2H), 3,20–2,74 (м, 116H), 2,70–2,58 (м, 54H), 2,54 (дд, J = 8,3, 4,0 Гц, 3H), 1,58 (т, Дж = 7,5 Гц, 5H), 1,49–1,10 (м, 176H), 0,92 (т, Дж = 7,3 Гц, 3H). ГПХ проводили с использованием водной системы, оснащенной показателем преломления и матричным фотодиодным детектором, с ДМФ в качестве элюента (0,5 мл, мин -1 , 40 °C) и полистироловыми стандартами, используемыми для калибровки. Mn (ГПХ) =4,10×10 3 , Mw (ГПХ) =4.95×10 3 , Mw/Mn=1,21.

Затем 100 мг T, 16 мг PPS и 4 мг TMZ помещали в стеклянный флакон и добавляли 200 мкл ДМСО и 800 мкл воды. Смешанный раствор добавляли в мешок для диализа с молекулярной массой = 3500 Да и подвергали диализу в течение 24 ч для удаления ДМСО. Затем этот стеклянный флакон помещали на водяную баню с температурой 50°C и нагревали до полного растворения смеси. Затем флакон удаляли и охлаждали до комнатной температуры. Когда в перевернутом флаконе наблюдалось отсутствие гравитационного потока, гелеобразование гидрогеля T/PPS завершалось.T/PLGA/TMZ, T/PLGA/DiR и T/PPS/DiR получали тем же способом. Концентрация DiR составляла 100 мкг мл -1 .

Изображение гидрогеля было получено с помощью просвечивающего электронного микроскопа высокого разрешения (FEI Tecnai G2 Spirit Bio TWIN, FEI, Hillsboro, OR, USA). Гидрогель готовили, как описано в предыдущем разделе, и разбавляли водой в 20 раз. Образец наносили на медную сетку, покрытую углеродной пленкой, окрашивали в течение 1 мин и сушили на воздухе при комнатной температуре.Наконец, его наблюдали с помощью ПЭМ и фотографировали.

Реологические свойства гидрогеля при 37°С оценивали с помощью динамического реометра (TA Instruments, США). Данные о модуле накопления (G′) и модуле потерь (G″) записывали с помощью динамической развертки по частоте деформации (0,1–100 Гц, деформация 5%) в диапазоне частот сканирования от 0,02 до 100 рад/с.

Разборка гидрогеля T/PPS и T/PLGA, нагруженного DiR, in vitro

Затем 50 мкл гидрогелей T/PPS/DiR и T/PLGA/DiR добавляли в 24-луночный транслуночный планшет и культивировали в осциллирующем инкубаторе. при 37 °С.PBS в лунках заменяли свежим PBS с MMP2 или без него (100 нг мл -1 ) и H 2 O 2 (1 мМ) в день 0. Гидрогели инкубировали в осциллирующем инкубаторе при 37 °C. снова, и интенсивность флуоресценции измеряли в дни 0, 1, 2, 3, 5 и 7 с помощью устройства визуализации (Caliper Life Sciences).

In vitro MMPs- и ROS-чувствительный высвобождение лекарственного средства

100 мкл гидрогеля T/PPS+TMZ и гидрогеля T/PLGA+TMZ помещали в центрифужную пробирку, содержащую буфер PBS без или с одним из следующих реагентов: MMP2 ( 100 нг мл -1 ), MMP9 (100 нг мл -1 ) и H 2 O 2 (1 мМ).Концентрацию препарата определяли, как сообщалось ранее [36]. В некоторые пробирки добавляли ингибиторы ММР2 или ММР9. Свежие ингибиторы MMP2, MMP9 или MMP2, MMP9+MMP2 и MMP9 добавляли в дни 1, 3 и 5. Пробирки инкубировали при 37 °C при встряхивании (70 об/мин). В разные моменты времени отбирали резервуар PBS объемом 100 мкл, концентрацию TMZ анализировали с помощью ВЭЖХ (Shimadzu, LC-10AT/sd-10a, колонка: Hyersil ODS C18 4,6, 200 мм, размер частиц 5 мкм), а также профиль высвобождения. нарисовано по протоколу.

Стандартная кривая TMZ: y=0,1158x−0,1756, R 2 =0,9963.

Биосовместимость in vitro

Клетки C6 или U87 (6×10 3 ) помещали в 96-луночные планшеты и культивировали в течение 24 часов. Затем растворы для замачивания гидрогеля T/PLGA и T/PPS заменяли средой. После инкубации в течение 24 часов цитотоксичность гидрогеля тестировали с помощью анализа МТТ. Для получения результатов измеряли поглощение при 570 нм. В качестве альтернативы клетки C6 культивировали на 24-луночных планшетах, содержащих 5×10 4 клеток.Через 24 часа к среде добавляли иммерсионные растворы PBS или гидрогеля. Клетки окрашивали с помощью набора для анализа живых мертвецов через 72 ч и наблюдали с помощью флуоресцентной микроскопии (Olympus, Takachiho, Япония).

Определение ММП и АФК в послеоперационной среде

Экспрессию ММП (ММП2 и ММП9) в послеоперационной среде определяли с использованием наборов ELISA, приобретенных у Laitian (Нанкин, Китай). Были выполнены неполные операции на мышах-носителях глиомы GL261, и остаточная опухолевая ткань была собрана через 1 час.В качестве контроля собирали опухолевые ткани мышей, которым не проводилось хирургическое вмешательство. Затем использовали наборы ИФА в соответствии с инструкциями производителя.

Экспрессию АФК определяли с помощью красителя дигидроэтидия (ДГЭ). Вкратце, образцы были собраны теми же методами и разделены на срезы. Срезы инкубировали с ДГЭ в течение 30 минут при 37 °C, а затем монтировали с использованием DAPI и покровных стекол. Срезы наблюдали с помощью флуоресцентного микроскопа. Интенсивность флуоресценции определяли количественно с помощью программного обеспечения ImageJ.

Оценка токсичности

Мышей с опухолями в разных группах (n=3) умерщвляли. Были собраны кровь и основные органы, включая сердце, печень, селезенку, легкие и почки. Основные органы окрашивали H&E. Плазму отделяли центрифугированием и анализировали на гепаторенальную токсичность с помощью модульного анализатора cobas 8000.

Результаты

Синтез и характеристика гидрогеля T/PPS+TMZ

Синтезирован чувствительный к АФК ППС 60 , структура ППС 60 подтверждена с помощью 1 Н ЯМР (рис.А(а, б)). Молекулярная масса ПФС составляла 4,1×10 3 , а полидисперсность (PDI) составляла 1,21, как определено с помощью ГПХ (рис. A(c)).

Гидрогель, чувствительный к MMP S и АФК, был сформирован посредством самосборки T и PPS 60 в ДМСО/вода. ТМЗ был инкапсулирован в гидрофобный слой PPS 60 в процессе самосборки T/PPS (рис. B). Кинетику гелеобразования гидрогеля T/PPS исследовали с помощью реологической оценки (рис. C).Три различных массовых соотношения PPS и TMZ (1:1, 2:1, 4:1, вес/вес) гидрогеля T/PPS+TMZ (10% вес/объем) были приготовлены и протестированы реологическим анализом. Значения G’ (модуль накопления) и G» (модуль потерь) были заметно увеличены. Значение G’ было примерно в три раза выше, чем значение G», что было убедительным доказательством образования гидрогеля T/PPS. Соотношение смешивания PPS и TMZ 4:1 давало наилучший эффект. Таким образом, для всех последующих экспериментов использовалось весовое соотношение ППС:ТМЗ 4:1. Затем поверхность гидрогеля T/PPS+TMZ исследовали с помощью ПЭМ, которая показала волокнистые сборки более высокого порядка (рис.Д).

Запускаемая MMPs и ROS разборка и высвобождение TMZ гидрогеля T/PPS+TMZ

Послеоперационные модели глиомы были успешно созданы, как описано ранее [39]. После операции по поводу глиомы в хирургическую полость вводили гидрогель T/PPS+TMZ (дополнительный файл 1: рисунок S1). ММП и АФК вырабатываются в избытке после повреждения тканей [40–42]. Острое повреждение тканей было неизбежным во время хирургического вмешательства; следовательно, ММП и АФК активировались в послеоперационной среде (дополнительный файл 1: рисунки S2 и S3).Как сообщалось ранее, Т-гидрогель мог разлагаться в ответ на ММП, в то время как ПФС демонстрировал АФК-зависимую активность [35, 43, 44]. Таким образом, оценивали способность гидрогеля T/PPS+TMZ высвобождать инкапсулированный TMZ в присутствии MMP и H 2 O 2 . Эксперименты по высвобождению TMZ in vitro проводились в присутствии MMP, H 2 O 2 или MMP2/MMP9+H 2 O 2 , имитируя среду MMP и ROS в хирургической полости (рис. A).Свежий фермент добавляли в дни 1, 3 и 5. Добавление MMP2 и MMP9 значительно увеличивало высвобождение TMZ из гидрогеля T/PPS+TMZ (50,3%, 46,3%) и гидрогеля T/PLGA+TMZ (45,0%, 43,0%), что указывает на то, что MMP вызывают деградацию богатой T внешней части гидрогеля, чтобы увеличить биодеградацию полимера PPS и PLGA с высвобождением TMZ. Как и ожидалось, быстрое высвобождение TMZ из гидрогеля T/PPS+TMZ наблюдалось, когда MMP2+H 2 O 2 (68,7%) и MMP9+H 2 O 2 (65.0%). По сравнению с гидрогелем T/PPS+TMZ гидрогель T/PLGA+TMZ без чувствительности к АФК, который был погружен в MMP2+H 2 O 2 (47,3%) и MMP9+H 2 O 2 (46,7%), имели почти такое же высвобождение TMZ в присутствии MMP (рис. B). Интересно, что ни гидрогель T/PPS+TMZ, ни гидрогель T/PLGA+TMZ значительно не улучшали высвобождение TMZ только при обработке H 2 O 2 . Это может быть связано со структурой гидрогеля.ROS-чувствительный PPS расположен внутри гидрогеля, и один только PPS не оказывает существенного влияния на высвобождение лекарственного средства, если только T во внешнем слое не разрушается.

Затем оценивали разборку гидрогеля T/PPS+TMZ, реагирующую на ММП и АФК. По сравнению с гидрогелем T/PLGA+TMZ, гидрогель T/PPS+TMZ, пропитанный PBS, содержащим MMPs и H 2 O 2 , имел небольшое количество остаточного гидрогеля после 5 дней погружения, что указывает на то, что большее количество T/PPS+ Гидрогель ТМЗ разбирали в условиях АФК и ММП (рис.С). Для дальнейшего мониторинга деградации гидрогеля гидрогели T/PPS и T/PLGA нагружали DiR с образованием гидрогелей T/PPS+DiR и T/PLGA+DiR. По сравнению с гидрогелем T/PLGA+DiR в присутствии MMP2+H 2 O 2 гидрогель T/PPS+DiR имел высокую дозозависимую потерю флуоресценции DiR (рис. D, E). Приведенные выше результаты показывают, что гидрогель T/PPS+TMZ обладал очевидной способностью реагировать на АФК.

Чтобы точно имитировать послеоперационную микросреду, была собрана спинномозговая жидкость (ЦСЖ) у пациентов с послеоперационной глиомой (отделение нейрохирургии, аффилированная больница Медицинского университета Сюйчжоу, номер госпитализации: 1782969) для проверки кинетики высвобождения TMZ (рис.А). Как показано на рис. 4B, 89,3% TMZ высвобождается из гидрогеля T/PPS+TMZ в условиях ЦСЖ, тогда как только 62,3% TMZ высвобождается из гидрогеля T/PLGA+TMZ в тех же условиях. Кроме того, чтобы контролировать разборку гидрогеля in vivo, мы исследовали способность гидрогеля T/PPS+DiR разбирать in vivo, используя модель послеоперационной глиомы. Как показано на рис. C, животных обследовали на 1, 2, 3, 5 и 7 дни с помощью системы кинетической визуализации IVIS in vivo. Как и ожидалось, сигнал флуоресценции гидрогеля T/PPS+DiR затухал быстрее, чем сигнал гидрогеля T/PLGA+DiR в послеоперационных условиях.Эти результаты демонстрируют, что гидрогель T/PPS+DiR может реагировать на послеоперационную среду и высвобождать инкапсулированное лекарство.

Ответная деградация гидрогеля T/PPS+TMZ в послеоперационном периоде. ЦСЖ был собран у пациентов с глиомой после операции. B Профиль высвобождения гидрогелей T/PPS+TMZ и T/PLGA+TMZ. Данные представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего (n=3). C Интенсивность флуоресценции гидрогеля T/PPS+DiR и гидрогеля T/PLGA+DiR после инъекции в хирургическую полость мышам-носителям GL261 на 0, 1, 2, 3, 5 и 7 дни ( a ) .Количественный анализ сигналов флуоресценции DiR мышей на 0, 1, 2, 3, 5 и 7 дни ( b ). Данные представлены в виде средних значений ± стандартная ошибка среднего (n=3)

Антиглиомный эффект гидрогеля T/PPS+TMZ in vivo

Для дальнейшего изучения способности гидрогеля T/PPS+TMZ эффективно ингибировать рецидив глиомы, неполную резекцию модель глиомы U87 была создана на голых мышах линии BALB/c. На 12-е сутки после имплантации опухоли выполнена операция, в операционную полость введен гидрогель Т/ППС+ТМЗ.После лечения в течение 18 дней было выполнено окрашивание H&E, чтобы подтвердить терапевтические эффекты гидрогеля T/PPS+TMZ (рис. A). По сравнению с группой PBS, размер группы гидрогеля T/PPS с рецидивирующей глиомой после операции был почти таким же, поскольку гидрогель T/PPS не имел побочных эффектов. Мыши, получавшие T/PLGA+TMZ и гидрогель T/PPS+TMZ, замедляли рецидив опухоли, при этом гидрогель T/PPS+TMZ продемонстрировал эффективность против глиомы выше, чем у гидрогеля T/PLGA+TMZ, что указывает на то, что MMPs и чувствительность АФК может усиливать высвобождение ТМЗ (рис.Б). Как и ожидалось, гидрогель T/PPS+TMZ показал лучшие результаты в отношении увеличения средней выживаемости (50,5 дней), в то время как средняя выживаемость мышей, получавших PBS, T/PPS и T/PLGA+TMZ, составила 28,5, 31,5 и 40,5 дней. соответственно (рис. C). Это изменение также отражалось в изменениях массы тела мышей с опухолями. Масса тела мышей в группе T/PPS+TMZ снижалась медленно, в то время как другие группы быстро теряли вес (рис. D). Для дальнейшей оценки антиглиомного эффекта гидрогеля T/PPS+TMZ использовали обнаружение апоптоза (TUNEL) для обнаружения апоптоза клеток глиомы.Как показано на рис. E, самая высокая доля апоптотических клеток наблюдалась в группе гидрогеля T/PPS+TMZ среди других групп лечения. Эти результаты свидетельствуют о том, что гидрогели T/PPS+TMZ, чувствительные к MMPs и ROS, могут усиливать терапию TMZ, вызывая апоптозную гибель клеток при глиоме.

Кроме того, была разработана ортотопическая модель глиомы C6-Luci, устойчивой к ТМЗ, для дальнейшей оценки эффективности ингибирования рецидивов глиомы с помощью гидрогеля T/PPS+TMZ. Через 8 дней после имплантации была проведена неполная операция на опухоли, и гидрогели Т/ППС+ТМЗ были введены в операционную полость (рис.Ф). Интенсивность флуоресценции глиом C6-Luci измеряли для оценки рецидива глиомы (рис. G, H). Глиома быстро рецидивировала после операции, и рост глиомы был быстрее в группах гидрогеля PBS и T/PPS. Группы гидрогеля T/PPS+TMZ и T/PLGA+TMZ продемонстрировали лучшую эффективность против глиомы с более низкой интенсивностью флуоресценции биолюминесценции, чем группы PBS и T/PPS, демонстрируя, что инъекция in situ гидрогеля, заключенного в TMZ, может ингибировать остаточную глиому. рост клеток. Кроме того, по сравнению с группой гидрогеля T/PLGA+TMZ, группа гидрогеля T/PPS+TMZ имела более низкую интенсивность флуоресценции биолюминесценции, что свидетельствует о том, что группа гидрогеля T/PPS+TMZ эффективно уменьшала повторный рост опухоли.Кроме того, мы отслеживали изменения веса и среднее время выживания у мышей. Как показано на рисунке I, медиана выживаемости мышей, обработанных PBS, гидрогелем T/PPS, гидрогелем T/PLGA+TMZ и гидрогелем T/PPS+TMZ, составила 19,5, 22,5, 32 и 50,5 дней соответственно. Медиана выживаемости мышей, обработанных гидрогелем T/PPS+TMZ, была самой продолжительной, а масса тела мыши снижалась наиболее медленно среди всех групп (рис. J). В целом, эти результаты дополнительно демонстрируют, что гидрогель T/PPS+TMZ с ММП и способностью реагировать на АФК улучшает эффективность ингибирования послеоперационного рецидива глиомы.

Биосовместимость in vivo

Для оценки безопасности потенциальная токсичность гидрогелей систематически исследовалась in vivo. После 10 дней лечения основные органы, включая печень, селезенку, почки, сердце и легкие, собирали и нарезали на срезы для окрашивания гематоксилин-эозином. Как показано на рис. A, в группах не наблюдалось явных гистологических аномалий или поражений, что указывает на отсутствие очевидной токсичности гидрогеля T/PPS in vivo. Результаты биохимического анализа крови также были сходными, показывая, что гидрогель T/PPS не вызывал значительного повреждения печени (рис.Б, В) или почек (рис. Г, Д). В совокупности эти результаты показывают, что гидрогель T/PPS+TMZ продемонстрировал превосходную биосовместимость in vivo .

Обсуждение

Глиома связана с деградацией и эволюцией нейроэпителиальных клеток и составляет 45% первичных опухолей головного мозга [10, 45]. Из-за агрессивного роста глиомы и периферической ткани головного мозга, а также из-за локализации многих опухолей в важных функциональных областях, таких как ствол мозга, таламус и центральная борозда, полное хирургическое удаление злокачественной глиомы невозможно, часто возникает рецидив опухоли [46, 47]. ].Фактически, из-за существования ГЭБ, ограничивающего системную токсичность и резистентность к химиотерапии, эффективность традиционных цитотоксических препаратов была сильно снижена. В этом случае локальная доставка лекарств является желательной альтернативой. Однако ни одно другое местное лечение на основе гидрогелей не было одобрено FDA с тех пор, как Gliadel® вышел на рынок в 1997 году. Учитывая потенциал гидрогелей, это явление озадачивало.

Чтобы получить идеальные гидрогели с лекарственными средствами для лечения рецидивирующей глиомы, необходимо учитывать множество факторов: (1) противораковые препараты с хорошей эффективностью.В ходе доклинических исследований привлекли внимание многие препараты, такие как гемцитабин, триметоприм и 5-фторурацил. Тем не менее, ТМЗ является препаратом выбора для пациентов с глиомой, поэтому основное внимание следует уделять местной доставке ТМЗ и предотвращению химиорезистентности. (2) Следует учитывать превосходную инъецируемость и адгезионную способность. В связи с анатомией и строением резекционной полости предпочтительнее полутвердые гидрогели с определенной степенью текучести. (3) Разлагаемость и биосовместимость.Материал гидрогеля должен обладать хорошей безопасностью и быть биоразлагаемым, чтобы избежать повторных операций на головном мозге и использования в качестве каркаса для роста опухоли. Таким образом, основными мишенями были натуральные или искусственные материалы с нетоксичностью и хорошей растворимостью.

По причинам, изложенным выше, в нашем исследовании был выбран гидрогель Tm для приготовления биосовместимого, чувствительного к микроокружению глиомы гидрогеля. Чтобы изучить характеристики гидрогеля, наполненного лекарственным средством, мы проанализировали морфологические особенности, реологическое поведение и высвобождение лекарственного средства.Результаты показали, что гидрогель T/PPS+TMZ обладал хорошей биосовместимостью и улучшал высвобождение TMZ в микроокружении глиомы.

Одновременно мы исследовали эффект ингибирования клеток глиомы in vitro. Анализ МТТ подтвердил, что новый гидрогель Т не обладал очевидной цитотоксичностью, что указывает на то, что гидрогель Т/ППС+ТМЗ обладал весьма благоприятной безопасностью. Кроме того, гидрогель T/PPS+TMZ продемонстрировал превосходную эффективность в анализе «живой/мертвый», что свидетельствует о том, что гидрогель T/PPS+TMZ обладает превосходным эффектом уничтожения опухолевых клеток.

Кроме того, мы построили модели глиомы in situ для исследования противоопухолевого эффекта гидрогеля T/PPS+TMZ in vivo. Для подкожной модели глиомы U87 in situ готовили H&E срезы клеточной глиомы U87 in situ для обнаружения противоопухолевого эффекта и строили кривые выживаемости и массы тела. Результаты показали, что группа Т/ППС+ТМЗ показала лучшие результаты среди всех групп, средний период выживания голых мышей в группе Т/ППС+ТМЗ значительно увеличился, а их масса тела снизилась медленно.Для модели глиомы C6-GFP in situ после подтверждения опухоли с помощью системы визуализации IVIS Spectrum In Vivo на 7-й день после имплантации опухоли глиому резецировали под микроскопом и в полость вводили различные группы гидрогелей. Опухоли также оценивали на 14-й и 21-й дни. Результаты показали, что интенсивность флуоресценции в группе Т/ППС+ТМЗ была значительно ниже, чем в других группах, а медиана выживаемости в экспериментальной группе была выше.Таким образом, мы подтвердили, что гидрогель Т/ППС+ТМЗ более эффективно ингибирует пролиферацию опухоли и увеличивает апоптоз опухоли.

Таким образом, мы успешно создали гидрогель T/PPS+TMZ с высокой биосовместимостью, чувствительный к микроокружению глиомы. Гидрогель T/PPS+TMZ повышал потенциальную эффективность TMZ in vitro и in vivo и проявлял устойчивый эффект против послеоперационного рецидива глиомы. Тем не менее, необходимы дальнейшие клинические испытания для поддержки этого метода.

Дополнительная информация

Сокращения

ТМЗ темозоломида
ПФС Поли (пропилен сульфид)
ММР матриксных металлопротеиназ
Т триглицерол моностеарат
ROS Реактивные виды кислорода BBB BBB BBB MGMT
MGMT O 6-Mehtylguanine-ДНК метильная перевод
PLGA Poly (Lactic-Co-Glycolic Cold)
PDI Полидисперсность
ЦСЖ Спинномозговая жидкость

Вклад авторов и участие в анализе данных


YZ.JJ и GZ проводили эксперименты, участвовали в анализе данных и написали рукопись. XH и LW собирали образцы спинномозговой жидкости и участвовали в экспериментах на животных. YZ, LZ участвовали в анализе данных. NK и JX помогают написать рукопись. HL и RY являются гарантом этой работы и обеспечивают техническое руководство. Все авторы просмотрели и отредактировали рукопись. Все авторы прочитали и одобрили окончательный вариант рукописи.

Финансирование

Работа выполнена при финансовой поддержке Национального фонда естественных наук Китая (81772665 и 81701281).Эта статья также финансировалась за счет Проекта социального развития Департамента науки и технологий Цзянсу (BE2020647) и Проекта медицинских исследований Комиссии здравоохранения провинции Цзянсу (M2020081). Исследование проводилось при поддержке Фонда Six Talents Peak в провинции Цзянсу (2018-WSW-071), Программы развития молодежной команды по научным и технологическим инновациям Медицинского университета Сюйчжоу (TD202000), Проекта социального развития Сюйчжоу (KC20079) и Инноваций в исследованиях и практике последипломного образования. Программа провинции Цзянсу (KYCX20-2496).

Доступность данных и материалов

Все данные, полученные или проанализированные в ходе этого исследования, включены в эту рукопись и ее Дополнительный файл.

Декларации

Одобрение этических норм и согласие на участие

Все эксперименты на животных проводились в соответствии с протоколами, утвержденными Комитетом по этике экспериментальных животных Медицинского университета Сюйчжоу (этический номер: 202007A258). ЦСЖ от пациента получали из аффилированной больницы Сюйчжоуского медицинского университета (Сюйчжоу, Китай).Патологоанатомический диагноз был поставлен в отделении патологии филиала больницы Сюйчжоуского медицинского университета. Это исследование было одобрено Комитетом по этике клинических испытаний дочерней больницы Медицинского университета Сюйчжоу. Информированное согласие было получено от всех участников (этический номер: XYFY2016-KL030-0l).

Согласие на публикацию

Неприменимо.

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов.

Сноски

Примечание издателя

Springer Nature остается нейтральной в отношении юрисдикционных претензий в опубликованных картах и ​​институциональной принадлежности.

Юфу Чжу, Цзюнь Цзя и Ган Чжао внесли равный вклад в эту работу

Ссылки

1. Ito H, Nakashima H, Chiocca EA. Молекулярные ответы на блокаду иммунных контрольных точек при глиобластоме. Нат Мед. 2019;25(3):359–361. doi: 10.1038/s41591-019-0385-7. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]3. Кастанеда К.А., Касавилька С., Оррего Э., Гарсия-Коррочано П., Деза П., Хейнике Х., Кастильо М., Белмар-Лопес С., Охеда Л. Глиобластома: молекулярный анализ и его клинические последствия.Rev Peru Med Exp Salud Publica. 2015;32(2):316–325. doi: 10.17843/rpmesp.2015.322.1627. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]4. Рич Дж. Н., Бигнер Д. Д. Разработка новых таргетных препаратов для лечения злокачественной глиомы. Nat Rev Drug Discov. 2004;3(5):430–446. дои: 10.1038/nrd1380. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]5. Лю Э.К., Сулман Э.П., Вен П.Ю., Курц С.К. Новые методы лечения глиобластомы. Curr Neurol Neurosci Rep. 2020;20(7):19. doi: 10.1007/s11910-020-01042-6. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]6.Лин Л., Цай Дж., Цзян С. Последние достижения в области таргетной терапии глиомы. Курр Мед Хим. 2017;24(13):1365–1381. дои: 10.2174/0929867323666161223150242. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]7. Темплтон А., Хофер С., Топфер М., Соммакал А., Фрец С., Черни Т., Гиллессен С. Экстраневральное распространение глиобластомы — отчет о двух случаях. Онкология. 2008;31(4):192–194. дои: 10.1159/000118627. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]8. Ахмед Р., Оборски М.Дж., Хван М., Либерман Ф.С., Маунтц Дж.М. Злокачественные глиомы: современные перспективы диагностики, лечения и ранней оценки ответа с использованием передовых методов количественной визуализации.Рак Манаг Рез. 2014;6:149–170. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]9. Нитта М., Мурагаки Ю., Маруяма Т., Икута С., Комори Т., Маэбаяси К., Исэки Х., Тамура М., Сайто Т., Окамото С., Чернов М., Хаяши М., Окада Ю. Предлагаемая терапевтическая стратегия для взрослой глиомы низкой степени злокачественности на основе агрессивная резекция опухоли. Нейрохирург Фокус. 2015;38(1):E7. doi: 10.3171/2014.10.FOCUS14651. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 10. Шарма Р.Р., Сингх Д.П., Патхак А., Хандельвал Н., Сегал К.М., Капур Р., Гошал С., Патель Ф.Д., Шарма С.К.Локальный контроль глиом высокой степени злокачественности с облучением ограниченного объема по сравнению с облучением всего головного мозга. Нейрол Индия. 2003;51(4):512–517. [PubMed] [Google Scholar] 11. Kadiyala P, Li D, Nuñez FM, Altshuler D, Doherty R, Kuai R, Yu M, Kamran N, Edwards M, Moon JJ, Lowenstein PR, Castro MG, Schwendeman A. Нанодиски, имитирующие липопротеины высокой плотности, для химиоиммунотерапии против мультиформной глиобластомы. АКС Нано. 2019;13(2):1365–1384. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]12. Чжан Дж., Стивенс М.Ф., Брэдшоу Т.Д.Темозоломид: механизмы действия, восстановление и резистентность. Курр Мол Фармакол. 2012;5(1):102–114. дои: 10.2174/1874467211205010102. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 13. Ge X, Pan MH, Wang L, Li W, Jiang C, He J, Abouzid K, Liu LZ, Shi Z, Jiang BH. Опосредованное гипоксией ингибирование апоптоза митохондрий индуцирует устойчивость к лечению темозоломидом через ось miR-26a/Bad/Bax. Клеточная смерть Дис. 2018;9(11):1128. doi: 10.1038/s41419-018-1176-7. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]14. Ян И, Сюй Зи, Дай С, Цянь Л, Сунь Л, Гонг З.Ориентация аутофагии на чувствительную глиому к лечению темозоломидом. J Exp Clin Cancer Res. 2016;35:23. doi: 10.1186/s13046-016-0303-5. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]15. Уорд С.М., Скиннер М., Саха Б., Эмрик Т. Конъюгаты полимер-темозоломид как терапевтические средства для лечения глиобластомы. Мол Фарм. 2018;15(11):5263–5276. doi: 10.1021/acs.molpharmaceut.8b00766. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]16. Ян Б., Ма Ю.Б., Чу Ш. Заглушение SATB1 преодолевает устойчивость к темозоломиду за счет подавления экспрессии MGMT и повышения экспрессии SLC22A18 в клетках глиобластомы человека.Ген Рака Ther. 2018;25(11–12):309–316. doi: 10.1038/s41417-018-0040-3. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 17. Цзян Г., Ли Л.Т., Синь Ю., Чжан Л., Лю Ю.К., Чжэн Д.Н. Стратегии улучшения уничтожения опухолей с помощью темозоломида: нацеливание на белок репарации ДНК MGMT. Курр Мед Хим. 2012;19(23):3886–3892. дои: 10.2174/092986712802002446. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 18. Hong LTA, Kim YM, Park HH, Hwang DH, Cui Y, Lee EM, Yahn S, Lee JK, Song SC, Kim BG. Гидрогель для инъекций улучшает восстановление тканей после травмы спинного мозга, способствуя ремоделированию внеклеточного матрикса.Нац коммун. 2017;8(1):533. doi: 10.1038/s41467-017-00583-8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]19. Норузи М., Назари Б., Миллер Д.В. Инъекционные системы доставки лекарственных средств на основе гидрогеля для локальной терапии рака. Наркотиков Дисков сегодня. 2016; 21(11):1835–1849. doi: 10.1016/j.drudis.2016.07.006. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 20. Bastiancich C, Vanvarenberg K, Ucakar B, Pitorre M, Bastiat G, Lagarce F, Préat V, Danhier F. Гидрогель липидных нанокапсул с лауроил-гемцитабином для лечения глиобластомы.J Управление выпуском. 2016; 225:283–293. doi: 10.1016/j.jconrel.2016.01.054. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 21. Liu H, Shi X, Wu D, Kahsay Khshen F, Deng L, Dong A, Wang W, Zhang J. Инъецируемый, биоразлагаемый, термочувствительный гидрогель с агрегированными наночастицами с опухолеспецифическим нацеливанием, проникновением и высвобождением для эффективной послеоперационной профилактики опухоли. повторение. Интерфейсы приложений ACS. 2019;11(22):19700–19711. doi: 10.1021/acsami.9b01987. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 22. У Х, Сонг Л, Чен Л, Чжан В, Чен И, Цзан Ф, Чен Х, Ма М, Гу Н, Чжан Ю.Инъекционный магнитный супрамолекулярный гидрогель со свойством конформности магнитокалорической жидкости предотвращает послеоперационный рецидив на модели рака молочной железы. Акта Биоматер. 2018;74:302–311. doi: 10.1016/j.actbio.2018.04.052. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23. Yang WJ, Zhou P, Liang L, Cao Y, Qiao J, Li X, Teng Z, Wang L. Инъекционный гидрогель, содержащий наногель, для синергетической терапии на основе последовательной локальной доставки комбретастатин-А4 фосфата (CA4P) и доксорубицина (DOX) Интерфейсы приложений ACS.2018;10(22):18560–18573. doi: 10.1021/acsami.8b04394. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 24. Bastiancich C, Bozzato E, Luyten U, Danhier F, Bastiat G, Préat V. Комбинация лекарственных средств с использованием инъекционного наномедицинского гидрогеля для лечения глиобластомы. Инт Дж Фарм. 2019; 559: 220–227. doi: 10.1016/j.ijpharm.2019.01.042. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 25. Deng H, Dong A, Song J, Chen X. Инъекционные термочувствительные гидрогелевые системы на основе функционального блок-полимера PEG/PCL для локальной доставки лекарств. J Управление выпуском.2019;297:60–70. doi: 10.1016/j.jconrel.2019.01.026. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 26. Таунсенд Дж.М., Бек Э.К., Герке С.Х., Беркланд С.Дж., Детамор М.С. Поведение потока до сшивания: необходимость в реологии предшественника для размещения гидрогелей в медицинских целях и для 3D-биопечати. Прог Полим Науки. 2019;91:126–140. doi: 10.1016/j.progpolymsci.2019.01.003. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]27. Талебиан С., Мехрали М., Таебния Н., Пенниси К.П., Кадумуди Ф.Б., Форуги Дж., Хасани М., Никха М., Акбари М., Ориве Г., Долатшахи-Пируз А.Самовосстанавливающиеся гидрогели: следующий сдвиг парадигмы в тканевой инженерии? Adv Sci. 2019;6(16):1801664. doi: 10.1002/advs.201801664. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]28. Лебель С., Роделл С.Б., Чен М.Х., Бердик Дж.А. Истончающиеся при сдвиге и самовосстанавливающиеся гидрогели в качестве инъекционных терапевтических средств и для 3D-печати. Нат Проток. 2017;12(8):1521–1541. doi: 10.1038/nprot.2017.053. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]29. Han J, Cui Y, Han X, Liang C, Liu W, Luo D, Yang D. Сверхмягкий гидрогель ДНК/декстрана с привитым дофамином в качестве динамического провода для электрических цепей, переключаемых в процессе микробного метаболизма.Adv Sci. 2020;7(13):2000684. doi: 10.1002/advs.202000684. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]30. Грим Дж. К., Браун Т. Э., Агуадо Б. А., Чапник Д. А., Виерт А. Л., Лю Х, Ансет К. С. Обратимая и повторяемая тиол-еновая биоконъюгация для динамического формирования паттерна сигнальных белков в гидрогелях. ACS Cent Sci. 2018;4(7):909–916. doi: 10.1021/acscentsci.8b00325. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]31. Фурниолс Т., Рэндольф Л.Д., Штауб А., Ванваренберг К., Лепринс Дж.Г., Преа В., Де Рье А., Данье Ф.Нагруженный темозоломидом фотополимеризуемый гидрогель на основе ПЭГ-ДМА для лечения глиобластомы. J Управление выпуском. 2015;210:95–104. doi: 10.1016/j.jconrel.2015.05.272. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 32. Zhao G, Jia J, Wang L, Zhang Y, Yang H, Lu Y, Yu R, Liu H, Zhu Y. Локальная доставка миноциклина и вориностата нацелена на микроокружение опухоли, чтобы ингибировать рецидив глиомы. Onco нацеливается на Ther. 2020;13:11397–11409. doi: 10.2147/OTT.S273527. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]33.Chao Y, Xu L, Liang C, Feng L, Xu J, Dong Z, Tian L, Yi X, Yang K, Liu Z. Комбинированная локальная иммуностимулирующая радиоизотопная терапия и системная блокада иммунных контрольных точек дает мощный противоопухолевый ответ. Нат Биомед Инж. 2018;2(8):611–621. doi: 10.1038/s41551-018-0262-6. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 34. Bastiancich C, Danhier P, Préat V, Danhier F. Гидрогели, содержащие противораковые препараты, в качестве систем доставки лекарств для местного лечения глиобластомы. J Управление выпуском. 2016; 243:29–42. дои: 10.1016/j.jconrel.2016.09.034. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 35. Гупта М.К., Мартин Дж.Р., Верфель Т.А., Шен Т., Пейдж Дж.М., Дюваль С.Л. Защитные клетки, термочувствительные гидрогели на основе трехблочного полимера ABC с активируемой АФК деградацией и высвобождением лекарственного средства. J Am Chem Soc. 2014;136(42):14896–14902. doi: 10.1021/ja507626y. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 36. Zhao Z, Shen J, Zhang L, Wang L, Xu H, Han Y, Jia J, Lu Y, Yu R, Liu H. Инъекционные послеоперационные гидрогели, чувствительные к ферментам, для устранения резистентности к темозоломиду и уменьшения местных рецидивов после операции по поводу глиомы.биоматерия наук. 2020;8(19):5306–5316. DOI: 10.1039/D0BM00338G. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 37. Liu H, Xie Y, Zhang Y, Cai Y, Li B, Mao H, Liu Y, Lu J, Zhang L, Yu R. Разработка инициируемой гипоксией и гипоксически радиосенсибилизированной липосомы в качестве носителя доксорубицина для стимулирования синергетического химио-/ лучевая терапия глиомы. Биоматериалы. 2017; 121:130–143. doi: 10.1016/j.biomaterials.2017.01.001. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 38. Хуа Л, Ван З, Чжао Л, Мао Х, Ван Г, Чжан К, Лю С, Ву Д, Чжэн И, Лу Дж, Ю Р, Лю Х.Гипоксически-чувствительные липид-поли-(гипоксические радиосенсибилизированные полипролекарства) наночастицы для химио- и лучевой терапии глиомы. Тераностика. 2018;8(18):5088–5105. doi: 10.7150/thno.26225. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]39. Bianco J, Bastiancich C, Joudiou N, Gallez B, Des Rieux A, Danhier F. Новая модель ортотопической резекции глиобластомы U-87 MG у бестимусных голых мышей. J Neurosci Методы. 2017; 284:96–102. doi: 10.1016/j.jneumeth.2017.04.019. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]40.Müller-Quernheim J. MMPs являются регуляторными ферментами в путях воспалительных заболеваний, повреждения тканей, злокачественных новообразований и ремоделирования легких. Eur Respir J. 2011;38(1):12–14. дои: 10.1183/036.00079311. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]41. Нитхаммер П., Грабхер С., Посмотрите А.Т., Митчисон Т.Дж. Тканевой градиент перекиси водорода способствует быстрому обнаружению ран у рыбок данио. Природа. 2009;459(7249):996–999. doi: 10.1038/nature08119. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]42.Ху Ю. П., Пэн Ю. Б., Чжан Ю. Ф., Ван Ю., Ю В. Р., Яо М., Фу XJ. Опосредованный активными формами кислорода простагландин E(2) способствует острой реакции на повреждение эпителия. Оксид Мед Селл Лонгев. 2017;2017:4123854. дои: 10.1155/2017/4123854. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]43. Джоши Н., Ян Дж., Леви С., Бхагчандани С., Слотер К.В., Шерман Н.Е., Амиро Дж., Ван Ю., Ригель Л., Хе Х., Руи Т.С., Валик М., Вемула П.К., Миранда О.Р., Леви О., Граваллезе Э.М., Алипрантис А.О. , Эрманн Дж., Карп Дж. М. На пути к системе доставки лекарств, реагирующей на обострение артрита.Нац коммун. 2018;9(1):1275. doi: 10.1038/s41467-018-03691-1. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]44. Гаджанаяке Т., Олариу Р., Леклер Ф.М., Даяни А., Ян З., Бонгони А.К., Банз И., Константинеску М.А., Карп Дж.М., Вемула П.К., Рибен Р., Фёгелин Э. Однократная локализованная доза ферментозависимого гидрогеля улучшает долгосрочную выживаемость васкуляризированного композитного аллотрансплантата. Sci Transl Med. 2014;6(249):249ra110. doi: 10.1126/scitranslmed.3008778. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]45. Аджаз М., Джеффрис С., Бразилия Л., Уоттс С., Чалмерс А.Текущие и исследуемые стратегии лечения глиобластомы. Clin Oncol (R Coll Radiol) 2014;26(7):419–430. doi: 10.1016/j.clon.2014.03.012. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]46. Мругала М.М., Чемберлен М.С. Механизмы заболевания: темозоломид и глиобластома — взгляд в будущее. Nat Clin Pract Oncol. 2008;5(8):476–486. дои: 10.1038/ncponc1155. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]47. Куинн Дж.А., Дежарден А., Вайнгарт Дж., Брем Х., Долан М.Е., Делани С.М., Вреденбург Дж., Рич Дж., Фридман А.Х., Рирдон Д.А., Сэмпсон Дж.Х., Пегг А.Е., Мошель Р.К., Берч Р., МакЛендон Р.Е., Провензал Дж.М., Гуруранган С. , Дэнси Дж. Э., Максвелл Дж., Турт-Улиг С., Херндон Дж. Э., 2-й, Бигнер Д. Д., Фридман Х. С.Испытание фазы I темозоломида плюс O6-бензилгуанин для пациентов с рецидивирующей или прогрессирующей злокачественной глиомой. Дж. Клин Онкол. 2005;23(28):7178–7187. doi: 10.1200/JCO.2005.06.502. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]


Статьи из Журнала нанобиотехнологий предоставлены здесь с разрешения BioMed Central

16 — трактори Харьковского тракторного завода. технические характеристики

С развоем польёприсреде постоянства потребления за купню специализированное опреме.Нису сви задачи могу носити масиван и снажан трактор, а користи се углавном за узгой поля велик подручья. За съебне радне и съебним потребама приевоза. Jedan od takvih Je traktor T-16. To je dizajniran samo za male poljoprivredne površine i hortikulture farmi. Особняк овог модели, за разлику од других у овой класси опреме — йе мьесто од агрегата и мьеняча, они су у стражнем диелу трактора. Prednji — оквир потпоре потребне опреме може бити инсталиран.

сфера primjene

T-16 — трактор gdje svestranost и flexibilnost.К е захвалююци ниской снази и другими компонентами к савршено может носить с готово било какав посао кои се могу односити на полиприроды, садоводство и других полиприродных послов. Osim toga, ovaj prijevoz se koristi i za isporuku određene халат.

Zbog svoje svestranosti i multi-funkcionalnost T-16 — traktor, koji je osvojio posebnu Popularnost među ljudima koji rade na terenu vezano za poljoprivredu. Изврсна управление вам омогучую да користите шасие иу поморским лукама, држи и железнички колодвор.

цена

Т-16 — трактор, дизайн в СКБ, смешение в Харькове. Первый строй уведен в 1961 году. U povijesti proizvodnje T-16 je nastao više od 600.000 opremu ovog modela. Трактор Т-16 се користи за овай дан у малим польъоприредним подузечима и прорачунских твртки. Sve zahvaljujući praktično, što je razlog zašto neke tvrtke ne propustite priliku za kupnju ovaj svestrani stroj. Т-16 — трактор има додатни простор како би се могли поправить урегай, као што су, на примьер, као платформа за утовар, электрическая пила, различитим материи за утовар лопате.Vrlo često, T-16 se koristi za prskanje i još междупахотная почва.

Трактор Т-16 — получена и улучшена версия ДВСШ-16, которая не очень популярна. Люди чим се не зове — и „шассик” и „сотона”, па чак и „конобар”. Производство моторных двигателей возила проводы се измеджу 1961. и 1967.-ог. Inženjeri su razvili poseban mjenjač, ​​koji je bio u mogućnosti biti odgovorni za obratne brzinama. Для того, чтобы поставить дио, коди име трактор Т-16. Za nesmetano я nesmetani рад stroja je instaliran remenice, koji se pokreće PTO glavne osovine.

изменение

Након модернизация и увеличение трактора ДВСШ-16 Т-16, чья фотография является приказом и наставкой, постао прецизионны, со скорым мотором. Важным является название модели от версии T-16M, koji je bio postavljen u dva cilindra дизель агрегат, koji se sastoji prvo 1995.

Након объявления «М» объявила о модернизации трактора Т-16 мг. Njegovi dizajneri su poboljšani na nekoliko načina. Prvo, чтобы je vrijedno spomenuti да kao rezultat modernizacije motornog vozila je postala pouzdan i svestran.Osim toga, znatno je poboljšana i fino sigurnosne postavke za vozača. Нови Т-16 мг, два инсталлированных агрегата D-21A1, который помогает электрическому двигателю и стартеру охлаждать зрака. Важно je naponuti prisutnost izvatkom platforme za prijevoz raznih vrsta tereta.

ažuriranje

Već 1986. год, биография je pružiti poboljšanu traktor T-16, od kojih je fotografija iznenadio sve ljubitelje prethodnu verziju. Чтобы получить новый T-16 мг, необходимо заменить кабину, а затем модернизировать электрическую емкость на дизельном двигателе с 25 снастями.Osim toga, popis poboljšanja uključuje rad povezan s promjenama u mehaniku šasije, odnosno izmijenjenom tri vratilo, s jednom od njih mogao raditi samostalno. Povećana učinkovitost, pouzdanost je povećana. Дизайнер добио врло свестран и поуздан трактор Т-16. Loader, koja se može ugraditi na šasiju, zahvaljujući redizajniranom motoru može pohvaliti bolje performance.

Šasija i pogonskih

Trčanje oprema — zavarene konstrukcije, što uključuje prednje i stražnje grede, dvije cijevi — lijevo i desno, kao i barovi koji ih povezuju.За единство градне додатне опреме коя се користи с посебним оквира отвора. Prijenosa T-16 Standardna Tehnika Takvog Plana. CPT priručnik sa 7 stupnjeva prijenosa. Osovine su postavljene poprečno na traktoru osi. Спойке — сухо тренье, одноместная площадка и стально затворена.

Kotačima u T-16 различите великолепие, zbog čega je traktor primio pomak težišta na pogonsku osovinu, koja pruža оптимальный vuču s površine ceste. Za obavljanje određenih zadataka može promijeniti širina kolosijeka od prednje i stražnje osovine.To će omogućiti da rade, na primjer, između redova, u staklenika ili vrt farmi.

поправци

Unatoč pouzdanost i kontinuitet stroja, ponekad techničke karakteristike traktora T-16 ne moraju odgovarati deklarirana od proizvođača. U ovom slučaju to je bolje obaviti održavanje propalih jedinica i jedinica za napajanje. Rezervni dijelovi mogu se kupiti izravno u tvornici, koji je uključen u izdanju T-16. Čak i nakon uklanjanja model iz proizvodnje rezervnih dijelova prestali objavljivanju.Zbog Popularnosti T-16 bi se pronašli pojedinosti nije teško. Трактор Т-16, od kojih je slika su prikazani u članku, neće ostati bez odgovarajuće popravak i održavanje.

Где купить?

С обзором на чиньенику модели, не издаваемой в течение длительного времени, купите Т-16 у савршеном техническим станью je ponekad vrlo teško. Su u uporabi može se naći u prodaji, poljoprivredni forum. Ona se može naći u klasicnoj verziji i sa dodatnim prilozima. Zbog Popularnosti и izvrsnu vrijednost оперативный результат пословья T-16 u prosjeku 25-30% выше других автомобилей iste klase, na primjer, kao sto su T-25.

вискас в гранулах эврика

Ako prihlásený užívateľ máte možnosť nastaviť si zobrazenie Heureky. Produkty Vybíráme Automaticky Poduly Recenzí â € | Pestrost A Atraktivitu Tohoto Krmiva Zajiå ¡¥ uje Kombinace Pä> Ti Rå¯zných Druhå¯ Granulí, Vä etnä> Drå¯beå¾īch kå ™ upavých polå ¡táå ™ kå¯s náplní, na kterých si VaÅ¡e koÄ ka opravdu pchutná. Завершите и выважены, Obsahuje chutné plnené гранулы — chrumkavý obal с lahodnou mäkkou náplňou Minulé akcie.Гранулы предварительно доспеле мачки од 12. месяцев век су выробени с черствей маса, обсахужу выважены помер витаминов и минеральных латок. Гранулы про коки про мала и большая пленка с низкой, нормальная и высокоактивная, драже пищевая, старое масло в сухом 4%, сухое молоко 29%, туки 1 5%. Naše krmivo uspokojí nutričné ​​potreby vašej mačky,… Typ zvieraťa: Mačička Heureka.cz vám poradí, jak vybírat Výukové aplikace. Вискас гранулированные кувшины для дозирования коек 14 кг. Вся информация о продукте Вискас гранулы с массой 14 кг, приготовление для интернет-магазинов, годность и рецензия Вискас гранулы с массой 14 кг.Маркетинговый продукт Kliknutím na «Rozumím» nebo jinam souhlasite také s využíváním cookies a predáním udajů o chování na webu pro zobrazení cílené reklamy na dalších webech. Техника… Гранулы для кока Вискас в гранулах с пищевым маслом 14 кг Вискас в гранулах с пищевым маслом 14 кг 96% 4566 однородных Акце Выбираете лекарство на 3 месяца после покупки 10%! Станьте членом MALL klubu pre miláčikov a tieto a ďalšie výhody sú vaše Registrujte sa nezáväzne a zadarmo…. Whiskas Dry с kuracím mäsom — je completnésuché krmivo pre dospelé mačky.Выробки: Вискас. Marcela B. Tyto гранулы konzumujà hlavnÄ› ježci a kosové, zakoupeno v U koÄek s nadváhou snižte dennà množstvà krmiva. … Гранулы Whiskas с ховезином для дозирования напитков 14 кг. Гранулированные ванильки с туниаком предварительно маки. Okrem delikatnych granúl sú plné jemných chrumkavých vankúÅ¡ikov plných mäsa. Вискас гранулы с кувшином для дозирования коек 14кг. ÄŒitaj viac. Вискас гранулы с ховязимом для дозирования коек 14 кг. Na základe vášho správania на Heureke personalizujeme jej obsah.LÃba, OvenÅený zákaznÃk Granule pro koÅ¥ata od výrobce WHISKAS ðŸ‘, доступный се slevou, в akci Ä и ve výprodeji в oväených Ä eských онлайн obchodech. Whiskas.cz.Сайт работает на IP-адресе 72.21.43.251, имя хоста 72.21.43.251 (США) время отклика на пинг 3 мс Отличный пинг. A a taurín na udržanie výborného zraku a vyvažený pomer minerálnych latok pre zdravie moÄ ových ciest.NejÄ astäji jsou podávané гранулы z důvodu jejich výhod, je to plnÄ› vyvážená strava, obsahuje veÅ¡keré vitamÃny a minerály, jednoduÅ¡e se skladuje, výivhoda . На складе. Чутнэ плнэнэ гранулы – купавэ звенку а с мэккоу и лаходноу нэплэ увнитэ™. стерилизованные машины. Гранулы Вискас в упаковке 14 кг. Станьте се Ä lenem MALL klubu pro mazlíÄ ky a tyto a dalÅ¡í výhody jsou vaÅ¡e. Розумием. Na základě vašeho chování на Heurece personalizujeme její obsah. Kliknutím на «Разумеется» nebo jinam souhlasite také s využíváním cookies a predáním údajů o chování na webu pro zobrazení cílené reklamy na dalších webech.Такое крмиво про коэн ки Вискас подает питательную смесь в полном объеме, а вывэ ¡Å¾энэ йадло про ває¡и доспэлоу коэ ку. Složenà podporujÃcà zdravà moÄ ových cest. До обхода крымива.ск. Складем > 5 кс. Респиратор общей защиты населения FFP2 NR CE 10 шт. Tyto plnÄ›né granule bude vaÅ¡e koÄka milovat – глотание звенку с молоком и лаходноу наплни увнитэ™. Oдпоручаме. Oblíbené u vÅ¡ech koÄ ek, protože je blíže Ä erstvÄ› chycenému úlovku. Крмиво про dospälé koÄky. 94 %. Пункт 1 из 1. Доправа 4,00 € Складом.ÄŒerstvá pitná voda musà být neustále k dispozici. Ceny produktů jsou uvádÄ›ny vÄ etnÄ› DPH. Вискас в гранулах с капсюлями перед молоком. 515 – 1 199 КЭ. Овечий заказник 20,09 – 52,68 € 20 обходоч. Na Heureke využívame персонализированный cielenú reklamu. Copyright © 2007–2021, Felix Sensations Multipack 24 x 85 г в желтой курже, ховези, краске, жене СЛЕВА ; … Whiskas взрослый drůbeží výběr v zelé 24 x 100 г капса курже,качна,друбеж,крута СЛЕВА. С этим продуктом WHISKAS® 1+ полностью однодвенен и выровнен кримиво-прострединный оптимальным количеством витаминов и минеральных латок помощ в том, абы сте ведели перед вају маÄ ку поскитнуу ÄÅ¡живу мо.Personalizáciu a cielenú reklamu si môžete vypnúť v nastaveniach prehliadača. 2. WHISKAS JUNIOR GRANULE S KUŘECÍM MASEM 14 КГ. Na základe vášho správania на Heureke personalizujeme jej obsah. Капсички. krmeni.cz, zakoupeno v Celý popis. RadiÅ¥ podľa. МОЛЛ.ЧЕХ. Výber v želé 48 pack, whiskas klasický výber Так ZELENINOU V Šťave 48 х 100 г, WHISKAS Стерильное Чутое плнене Гранула S Курачим Mäsom 1,4 кг, Whiskas Mäsový výber v Šťave Kompletné Krmivo Pre Dospelé Mačky 24 x 100 G, Whiskas Junior Klasický výber в упаковке 48 x 100 г, Whiskas Hydinový Výber в упаковке 48 x 85 г, Whiskas Adult куриное молоко в упаковке 400 г, Whiskas mäsový zeleniný výber в упаковке 24 x 100 г.Completné krmivo pre zdravú kožu a srsť a udržanie dobrého zraku dospelých mačiek. Jako pÅ™ihlášený uživatel máte možnost nastavit си zobrazenà Heureky. NaÅ¡e krmivo poskytuje vÅ¡etku výživu, ktorú vaÅ¡a maÄ ка potrebuje к dlhému a Å¡Å¥astnému životu. Vybírejte си Výukové aplikace podle parametrů srovnávejte ceny z internetových obchodů na Heurece. Žiadna maÄka nemoôže odolaÅ¥ уникальная чутi krmiva Whiskas! Kliknutím ZDE opakujte pokus. Technické specifikace se mohou zmÄnit bez výslovného upozorníní.Цена продукта без доп. Гранулы для взрослых Whiskas для взрослых с туниаком 14 кг. Na Heurece využíváme Personalizaci cílenou reklamu. Полные гранулированные кримиво для дозирования коаки с твердым покрытием. Эврика; Hobby Chovateľstvo Pre mačky Крмиво и витамины перед маской Whiskas в гранулах с куриным маслом и ятровым наполнителем 300 г Whiskas в гранулах с куриным маслом и ятровым наполнителем 300 г Zavrieť galeriu. -8% 30,90 €. Закажите сортировку Гранулы для дозаправки коек, которые можно смешивать со смолой 37% с MOC (цена ниже или 310 KÄ, левна) в торговом центре e-shopu.Technické Å¡pecifikácie sa môžu zmeniÅ¥ bez výslovného upozornenia. Крмиво и витамины перед маки. Je to ovÅ¡em málo ароматические krmivo, to může mÃt za náledek horÅ¡Ã pÅ™ijÃmánà potravy. Гранулы прококки про мала и большая пленка с низкой, нормальная и высокоактивная, рыбная прикормка, красное масло в сухом 4%, живочищенные белки 4%, туки 12,5%. Крмиво про кочки. Крмиво и витамины про коки Nuova Fattoria, Glanz Meister, соль до мики + Zinek 1,2 кг, Amos Barva na sklo 22 мл жидкий GDcolour Ä .11 TMAVÄš ZELENà , Beneto Stylový stÅ™Ãbrný etÃzek AGS635, KoÄ ky ho milujà a majà ho rádi i ježci, finanÄ nÄ› pro mne jako důchodkyni velmi véhodn Гранулы MaÄ ky 2011. Гранулы Whiskas с высоким содержанием большого количества витамина А, омега-6 жирных кислот, цинка, специальной рецептуры на подпору мочевого тракта и большое количество полезных минералов. Heureka Group a.s., Heureka.cz vám poradí, jak vybírat Vidle. … Гранулы Whiskas с ховязимом для дозирования коек 14 кг. Выробка: Вискас.Вискас гранулы с туниаком 14 кг. Купите доправу zadarmo на 3 mesiace и 10 % zľavu na prvý nákup! Вискас гранулы с ховезем для дозирования напитков 14 кг. Гранулы Whiskas обсахаривают все минеральные вещества до состояния здоровья и длительности жизни вашей машины. Гранулы Whiskas с туниаком 14 кг от 21,23 € — Heureka.sk 693 KÄ. Гранулы Whiskas jsou nutriÄnÄ› completnà a vyvážené krmivo pro dospälä koÄky. Váš kontakt zpracujeme pro upozornÄ›nà na dosaženà hlÃdané ceny pro zasÃlánà naÅ¡ich nabÃdek, pokud je neodmÃtnete.Найвыя цены. Personalizaci a cÃlenou reklamu si můžete vypnout v nastavenà prohlÞeÄ e. Å peciálna receptúra ​​obsahuje vÅ¡etky živiny, ktoré vaÅ¡e maÄ iatko potrebuje k tomu, aby vyrástlo vo zdravú maÄ ku. Складем. Гранулы для взрослых Whiskas pre dospelé maÄky s tuniakom 14 кг. ТОП 4 в категории кримво и витамины для коек. Na Heureke využívame персонализированный cielenú reklamu. Розумием. Смесь для запекания Whiskas kapsa výběr 12 x 85 г. 4,60 – 7,40 €. 439 отзывов. — Jemne nadychaná a mimoriadne chutná potrava obsahuje lahodné mäsové kúsky v… U nás nájdete vyše 15 400 000 продуктов и 10 900 интернет-обходов. Bližšà informace o zpracovánà osobnÃch údajů mimo EU a vaÅ¡ich právech, najdete v sekci 30,80 € На складе над 100 кс. Вискас гранулы с курачим 14 кг. Крмиво… Technické … Granuly pre maÄky pre malé a veěké plemená s nízkou, normalnou and vysokou aktivitou, hydinová príchuÅ¥¥, obsah Ä erstvého mäsa v suÅ¡ine 4%, živoÄ íÅ¡ne beelkoviny — 25%, tuk 11. ,04 €/1 кг. Tyto plnÄ›né гранулы bude vaÅ¡e koÄ ka milovat – kÅupavà zvenku a s mäkkou a lahodnou náplnà uvnitÅ™.Получите доплату на 3 месяца с 10% процентной ставкой на покупку! Profitujte z naÅ¡ej ponuky! Personalizaci a cÃlenou reklamu si můžete vypnout v nastavenà prohlÞeÄ e. Iba krmivo Whiskas ponúka vankúšiky z kuracieho mäsa s chutnou pečeňovou náplňou — chrumkavé zvonku a… Whiskas krmivo pre mačky obsahuje rôzne druhy mäsa, ktoré dodavajú krmivu zakaždåm iný. Складем. Kliknutím на «Rozumiem» alebo inam súhlasite aj s využívaním cookies a odovzdaním údajov o správaní na webe pre zobrazenie cielenej reklamy na dalších weboch.Kliknutím на «Rozumiem» alebo inam súhlasite aj s využívaním cookies a odovzdaním údajov o správaní na webe pre zobrazenie cielenej reklamy na dalších weboch. Heureka.cz vám poradí, jak vybírat Pro kočky. Doplnit stravu pak můžete různými salámy, polévkami, nebo млеки. WHISKAS® розумие того, Ä o vaÅ¡a maÄ ka ľúbi а va aka svojej prirodzenosti Ä o potrebuje. Výber v želé 48 pack, whiskas klasický výber Так ZELENINOU V Šťave 48 х 100 г, WHISKAS Стерильное Чутое плнене Гранула S Курачим Mäsom 1,4 кг, Whiskas Mäsový výber v Šťave Kompletné Krmivo Pre Dospelé Mačky 24 x 100 G, Whiskas Junior Klasický výber v omáčke 48 x 100 г, whiskas hydinový výber v omáčke 48 x 85 g, whiskas roub kuřecie mäso v omáčke 400 g, krmivo a vitamíny pre mačky bosch tiernahrung, Kaps dlhý obuvák na topánky 50 см plastový, эволюция Group Strieborné nášnice Visiace S Kryštálmi Сваровски микс фариеб полкрух 31123.3 сакуры, Geko Sada náradia 16ks (klieste, combinačky). Vďaka rôznym… Наше криво успокои нутричнэ потреби вашей мачки, абы прежила дли а слабый живот Купит 649,-. Баление 300 г. 14 кг. Гранулы перед маки перед мале и большой массой с низкой, нормальной и высокоактивной, гигиенической причудой, обсах Ä эрствіго маса в суони 4%, кисломолніх белков 29%, тук 12,5%. Вискас Стерильные гранулы с курицей для кастрации капель 14 кг. MILAN PÄšKNÃ, zakoupeno v Zavrieť galériu.Komletné krmivo pre dospelé mačky s kuracím mäsom a zeleninou. Heureka.cz vám poradí, jak vybírat Hry на zahradu. Na Heureke využívame персонализированный cielenú reklamu. Эврика; Hobby Chovateľstvo Pre mačky Крмиво и витамины перед маской Whiskas Гранулы для напитков Куржечи 340 г Whiskas Гранулы для напитков Куржечи 340 г Zavrieť galeriu. Na Heurece využíváme Personalizaci cílenou reklamu. UmožnÄ›te pÅ™echodnou fázi pÅ™i zmÄ›nÄ› стравы и upravte dávky podle potÅ™eb vaÅ¡eho domácÃho mazlÃÄ ка. Personalizáciu a cielenú reklamu si môžete vypnúť v nastaveniach prehliadača.Okrem delikatnych granúl sú plné jemných chrumkavých vankúÅ¡ikov plných mäsa. 439 отзывов. vÅ¡echna práva vyhrazena. S vyÅ¡Å¡ím obsahom витамина E a taurínu pre podporu prirodzenej obranyschopnosti. Na základe vášho správania на Heureke personalizujeme jej obsah. Fera24.cz, složenà hrůza, ale koÄky ho milujà :o), Ověřený zákaznÃk Na Heurece využíváme personalizaci a cílenou reklamu. Každá porcia je starostlivo vyvažená tak, aby obsahovala vÅ¡etky živiny, витамины и минералы, ktoré vaÅ¡a maÄ ka potrebuje.ВИСКАС. Whiskas Adult 14kg от 19,73 € с понуками 9 интернет-магазинов Покажите цены на параметры Whiskas Adult 14kg на Pricemanii uÅ¡etrite až до 60%! Nakupte pÅ™s oranžové tlaÄ Ãtko „Kupit na Heurece“ budete mÃt jistotu, že: ZÃskejte pÅehled o vývoji ceny ve vámi vybraném obdobÃ. Выробка: Вискас. Chrumkavé krmivo с lahodnou náplňou je obohatené или витамином A и омега-6 жирными кислотами. 4778 годноцени. Половина цен. Гранулы Whiskas jsou nutričně completní a vyvážené krmivo pro dospele kočky.Heureka.cz vám poradí, jak vybírat Pro koÄky. Вискас Стерильные гранулы с пищевыми добавками для кастрации 14 кг. AkÄ né letáky. Vybírejte si Pro kočky podle parametrů a srovnávejte ceny z internetových obchodů na Heurece. Гранулы Whiskas с ховязим масем 14 кг LEVNÄš. Whiskas Adult с массой 14 кг. 73 — 455 КЭ. Copyright © 2007–2021, Pomaha čistiť zuby jemným otieraním. Personalizáciu a cielenú reklamu si môžete vypnúť v nastaveniach prehliadača. Každá porcia je starostlivo vyvažená tak, aby obsahovala vÅ¡etky živiny, витамины и минералы, ktoré vaÅ¡a maÄ ka potrebuje.Нутриенты с добавочными добавками: витамин А: 4760 МЕ; витамин D: 525 МЕ; витамин Е: 96 м; саран ма нат? пентагидрат: 16 мг; саран. манганат моногидрат: 67,5 мг; йодид драсельна: 1,3 мг; селенитан содный: 0,38 мг; таурин: 1870 мг; саран зиненат моногидрат: 180 мг. ChybÃ Ä i je nepravdivý nÄ›který důležitý параметр? Kvalitnà suché krmivo pro koÄ ky Whiskas poskytuje vÅ¡e, co vaÅ¡e dospälá koÄ ka z hlediska výživy potÅebuje pro dlouhý a spokojený život. Na Heurece využÃváme personalizaci cÃlenou reklamu.Специальная рецептура перед подпором здравых… Такие криво с лаходноу куракоу причутоу боло вывинутэ специалне перед потреблением кастрированных, прип. OdporúÄ ame. WK3-677, 2 шт. в картон. Vybírejte си Pro koÄ ky podle parametrů a srovnávejte ceny z internetových obchodů na Heurece. ÄŒitaj viac. Na Heureke využívame персонализированный cielenú reklamu. Completné krmivo pre dospelé mačky. Celý поп. Такое молоко для кокаи WHISKAS® 1+ вводят в состав питательных веществ, а также вываривают жидло для ванилина, кото- рое продлевает и… Гранулы Whiskas обсушивают валенки из минералов, а также превращают в драже. vaÅ¡ej maÄ ky.Предава са в 13 обходах … Heureka Group a.s. С омега-6 мастнýми киселинами и цинкем, ктерé помáхайджà удрžет здравoй кůžи с рст, с витамином А для добрý zrak. Dalibor, Ovääený zákaznÃk Whiskas Junior Cat гранулы для кормления до 1 года с курацием в масле 300 г Полное молоко с витамином Е и вапником перед справкой растительной массы. 539 КÄ -37 %. Whiskas 1+ в гранулах, приготовленных из чистого молока, содержит большое количество витаминов и минералов, а кто Ваша машина, нуждается в потреблении перед длительным и слабым животом.Акче. Na základě vašeho chování на Heurece personalizujeme její obsah. KliknutÃm на „RozumÀœ nebo jinam souhlasÃte také s využÃvänánÃm cookies и pÅ™edánÃm údajů o chovánà na webu pro zobrazenà cÃlené reklamy na dal webé. Heureka Group a.s., 98 % 1 591 отзыв Моёности. všetky práva vyhradené. Na Heurece využíváme Personalizaci cílenou reklamu. POPIS PRODUKTU VLASTNOSTI 1+, Kompletní a vyváå¾ené, nau Å kommivo poskytuje veå kerous výå¾ivu, kterous vaå u koá Å å ~ ¥ astnému životu, Pomáhá ä istit zuby jemným otíráním, speciální rec … од 279 КЭ . Обиловины, масло и растительное масло (29 %, растительное масло 4 %, свежая крупа, гранулы), масло и туки, ростлинное масло, минерные экстракты желтки, зеленина (4 % зерна в оранжевых гранулах, 4 % зерен в зеленых гранулах), крупный ростлинный порошок. látek: 8,7%, грубая кислота: 1,5 %, омега-6 мастная кислота: 2,2 %.Â. Dodavajú Вашу мачку сразу, чо потребуйе.

Медодолы Копске Седло, Obchodné Meno živnostníka, Полногосподарский Техник, Звышение Инвалидного Доходку 2020, Top Reality Братислава Дубравка, Litánie K Najsvätejšiemu Srdcu Ježišovmu, Новая Ресторация Трнава, Клбова Вызыва Пре Псов Форум,

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.